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细胞爬片的免疫荧光步骤的分析

点击次数:572 发布时间:2017/9/19 9:35:18
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吴*
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实验室所做的大部分细胞爬片的免疫荧光步骤基本一致:
1.取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。
注意:有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心,注意 反正面,放在皿里洗比较方便,避免了来回夹取,另外洗的时候加PBS不要太冲,不要细胞冲下来。洗的时候我都是多加PBS,稍晃一下就倒掉,没有等5分钟或10分钟。
2. 4%冷的多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。
3. 0.2%Triton X-100通透10分钟,PBS洗三遍。
4. 与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,PBS洗三遍。
5. 一抗4度湿盒内过夜,也可37度2小时,感觉前者效果好,PBS洗三遍。
6.二抗室温2小时(避光),或者37度1半小时,PBS洗三遍。
7.用DAPI染核,然后直接照荧光片。
8.蒸馏水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周,因为甘油不象树脂那样会干,所以不用指甲油封的话会弄的一塌糊涂。

Multi-class antibodiesAnti-mucin 5B/Muc5B 粘蛋白-5B抗体规格: 0.2ml

Multi-class antibodiesAnti-mucin4/Muc4(human) 粘蛋白-4抗体规格: 0.2ml

Multi-class antibodiesAnti-MuRF1/Trim63 肌肉细胞特异性泛素蛋白连接酶1抗体规格: 0.2ml

Multi-class antibodiesAnti-MyD88 髓样分化蛋白抗体规格: 0.2ml

Multi-class antibodiesAnti-NIPP1/ARD1 核抑制蛋白磷酸酶1抗体规格: 0.2ml

Multi-class antibodiesAnti-Myelin Protein Zero 外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗体规格: 0.1ml

Multi-class antibodiesAnti-PMP2 周围神经髓鞘蛋白2抗体规格: 0.2ml

Multi-class antibodiesAnti-MYSM1 MYSM1抗体规格: 0.2ml

原创作者:上海谷研生物科技有限公司

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