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兔免疫球蛋白G(IgG)elisa试剂盒怎么用?

提供者:上海信帆生物科技有限公司   发布时间:2017/8/16 14:05:28  阅读次数:3762次  进入该公司店铺

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兔免疫球蛋白G(IgG)elisa试剂盒简介

免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)是血清中免疫球蛋白主成分,约占血清中免疫球蛋白总含量的75%,正常值为9.5~12.5mg/ml。免疫球蛋白G是机体抗感染免疫的主力抗体,机体在抗原刺激下产生多数抗菌、抗病毒、抗毒素抗体属于免疫球蛋白G。临床上常应用免疫球蛋白制剂防治传染病、某些肿瘤和免疫缺损病等。

兔免疫球蛋白G(IgG)elisa试剂盒操作方法

实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。

1. 加样:分别设空白孔、孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。

为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的品溶液。

2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。

3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。

5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后15分钟以内进行检测。

1、操作简单、快速。所有操作步骤,都有图谱示意,让你简单明了,不必为研究操作步骤而耽搁时间。

2.灵敏度高。酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。我们的试剂盒实现了在ug、ng、pg水平上对其进行定量。

3.特异性强。特异性来自抗体或抗原的选择性。采用国际知名的原装抗体抗原,保证的试剂盒品质。

4.性价比高,质量稳定。

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