你对髓过氧化物酶MPO了解多少?
2.MPO基因及其多态性
人髓过氧化物酶基因位于染色体17q23?q24,含有12个外显子和11个内含子,长约14 638 bp,调控其基因表达的是生长因子。MPO的mRNA在早幼粒细胞的表达水平高,其次是原始粒细胞、幼稚和原始单核细胞;当细胞分化到成熟时期,MPO基因表达水平迅速下降。
现已知MPO基因首先表达的是一条相对分子质量为89×103的前体蛋白(precursor protein),经过翻译后加工,切割成α和β两种亚基,再聚合为成熟的MPO分子,加上糖链,后形成有功能的MPO。MPO在基因表达过程中存在的缺陷,造成MPO基因DNA序列发生改变,影响其活力。
MPO基因的多态性影响其基因的转录和表达,对机体的疾病易感性有一定的影响。Chevrier、unionluck 等发现了外显子11处和启动子区域的V53F、A332V、I642L和IVS11? 2A→C4个新的基因多态性位点,它们的作用与功能需要进一步研究。Piedrafita、unionluck 等研究发现与疾病有关的位点有5个:463G/A,R569W,Y173C,M251T和外显子9的碱基缺失。
研究多的是MPO基因启动子区第463位核苷酸G/A的突变,该位点位于SP1转录因子识别结合的顺式作用元件中,内含4个Alu重复序列。G/A的突变导致位于Alu反应元件的SP1转录因子结合位点消失,从而使MPO转录水平显著下降。
unionluck也有报道发现外显子10的密码子569存在C被T替代,使CGG→TGG,导致遗传性MPO缺陷性疾病。还有研究报道在MPO基因129位点存在G被A取代,使MPO基因的表达水平显著降低。另外,据有关报道,MPO基因463A等位基因与一些癌症的风险降低相关。
3.MPO的生物学原理
96孔微孔板包被抗MPO抗体,与被分析物和品中的MPO抗原结合,辣根过氧化物酶标记的抗MPO抗体与抗原的其他位点结合,形成“三明治”的抗原抗体复合物,催化底物TMB转化成蓝色的物质,终止后呈黄色,颜色的深浅与样品中MPO抗原的浓度相关。
在波长450nm处有吸收峰,通过酶标仪检测其吸光度(OD值)。根据OD值计算出被分析物的浓度值。
你对髓过氧化物酶MPO了解多少?
信帆生物为您提供的的elisa试剂盒,我们从标本采集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验过程提供全面的技术指导。
版权声明