制备细胞裂解物：
1.每100ml培养物的细胞沉淀悬于4mlPBS；
2.加入溶菌酶至终浓度1mg/ml，冰上放置30min；
3.用针筒将10ml 0.2%Triton X-100强行注入细胞裂解物中，剧烈震动数次混匀；
4.加入DNase和RNase至终浓度5μg/ml，4℃震动温育10min；
5.4℃ 3000g（5000r/min）离心30min；
6.上清转移到一只新试管，加入DTT至终浓度为1mmol/L。
纯化融合蛋白：
7.细胞裂解物与50%谷胱甘肽-琼脂糖树脂匀浆混合，每100ml细胞培养物加2ml树脂，于室温下轻摇0min；
8.混合物于4℃以500g（2100r/min）离心5min，小心去掉上清并留样少许进行SDS-PAGE；
9.沉淀中加入10倍标准体积的PBS，颠倒离心管数次混匀，洗去未与树脂结合的蛋白；
10.4℃以500g（2100r/min）离心5min，小心去掉上清并留样少许进行SDS-PAGE；
11.重复步骤9和10两次；
12.结合的GST融合蛋白可用谷胱甘肽洗脱缓冲液洗脱，也可用凝血酶，肠激酶或Xa因子切割，释放靶蛋白。
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