液和牛血清白蛋白(BSA)溶液作为蛋白质标准溶液，测定范围为50 -1000 μg/ml。
注意事项 在使用本试剂盒之前请务必阅读此注意事项。
1. 考马斯亮蓝染液与石英比色皿可以产生强烈的结合，因此建议使用玻璃或塑料比色皿。
2. 疏水的膜或“粘”蛋白在考马斯亮蓝染液存在下可以形成沉淀，可以使用少量的NaOH促
进蛋白的溶解。(在这种情况下向样品中加入等体积的1 M NaOH)
3. 由于不同蛋白与考马斯亮蓝染液的结合程度不同，因此使用被测蛋白做标准曲线，可以
得到更准确的结果。
4. 应按蛋白浓度由低到高的顺序进行测定，测定过程请连续进行，不要清洗比色皿，因为
水质会影响测定结果。
操作步骤：
1. 考马斯亮蓝染液在使用前应平衡温度至室温并温和颠倒混匀，预热分光光度计；
2. 将0、10、20、30、40、50、60 μl牛血清白蛋白(BSA)标准溶液（1 mg/ml）分别加入到
试管中，加入PBS补足到150 μl；
3. 将适当体积的样品加入到试管中，并用PBS补足到150 μl；
4. 向各试管中加入2.85 ml考马斯亮蓝染液，混匀，室温放置5-10 min；
5. 用分光光度计测定595 nm 处的吸光值，并记录读数；以不含BSA 的样品的光吸收值作为
空白对照。
6. 绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内，
请稀释样品后重新测定。
7. 若用微孔板检测按上述体系比例缩小10倍操作即可。
附：PBS配方：
PBS缓冲液(pH7.2-7.4)：137 mmol/L NaCl ，2.7 mmol/L KCl ，10 mmol/L Na2HPO4 ，
1.76 mmol/L KH2PO4。
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