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免疫组织抗原修复方法

提供者:上海研生实业有限公司   发布时间:2015/8/12 13:58:45  阅读次数:202次  进入该公司店铺

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抗原修复方法:

① 柠檬酸钠法:

(a) 把玻片放在玻璃固定架上,再将架子放在盛有600ml的10mM柠檬酸钠(pH6.0)的容器中。

(b) 微波中高火6-8min。

(c) 室温冷却。

(d) 用PBS洗涤3次,每次5min。

② 蛋白酶K法:

(a) 配制新鲜溶液:

25μl 20mg/ml蛋白酶K

2.5ml 1MTris-HCl(pH8.0)

0.5ml 0.5M EDTA(pH8.0) 加水定容到50ml

(b) 37℃下,将玻片放在架子上孵育5min(蛋白酶K不要预热)。抗原

(c) 用PBS洗涤3次,每次5min.

③ 尿素法:

(a) 把玻片放在玻璃固定架上,再将架子放在盛有600ml 的1M尿素(新鲜配制)的容器中。

(b) 微波10min,20min或者30min,每5min补充一次蒸发掉的水。

(c) 冷却30min到1h。

(d) 用蒸馏水洗涤4次,每次3min,再用PBS洗涤3min。抗原

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