抗原修复方法:
① 柠檬酸钠法:
(a) 把玻片放在玻璃固定架上,再将架子放在盛有600ml的10mM柠檬酸钠(pH6.0)的容器中。
(b) 微波中高火6-8min。
(c) 室温冷却。
(d) 用PBS洗涤3次,每次5min。
② 蛋白酶K法:
(a) 配制新鲜溶液:
25μl 20mg/ml蛋白酶K
2.5ml 1MTris-HCl(pH8.0)
0.5ml 0.5M EDTA(pH8.0) 加水定容到50ml
(b) 37℃下,将玻片放在架子上孵育5min(蛋白酶K不要预热)。
抗原(c) 用PBS洗涤3次,每次5min.
③ 尿素法:
(a) 把玻片放在玻璃固定架上,再将架子放在盛有600ml 的1M尿素(新鲜配制)的容器中。
(b) 微波10min,20min或者30min,每5min补充一次蒸发掉的水。
(c) 冷却30min到1h。
(d) 用蒸馏水洗涤4次,每次3min,再用PBS洗涤3min。
抗原
版权声明