荧光色素的荧光光谱和量子产率受环境影响,
elisa试剂盒这也是众多荧光素具有探针作用的基础。影响因素主要有:
1)荧光色素染液的pH:荧光色素是否发射荧光以及辐射何种荧光与它们在溶液中的存在状态有关。荧光色素均含有酸性或碱性助色团.溶液的酸碱性对它们的电离有影响,每种荧光色素有它最适宜的pH。一些荧光色素在pH 8.5~9.5g寸,发射荧光较强,例如1-萘酚-6-磺酸在pH 6.4~7.4的溶液中会发射蓝色荧光,当pH低于6.4时,则不发射荧光。
2)温度:荧光色素的荧光量子产率和荧光强度通常随溶液温度的降低而增加,如荧光素的乙醇溶液在0℃度以下每降低10℃荧光量子产率增加3%,降至-80℃时,荧光量子产率接近100%;反之则减弱,甚至导致荧光淬灭。但一般在20℃以下荧光量子产率随温度变化不太明显,故进行荧光染色过程中,要注意控制温度。但有些荧光染色如荧光抗体 染色,在37℃时,温度对异硫氰酸荧光素的荧光效率无明显影响。
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