染色弱的常见问题和解决办法

常见问题 解决办法
抗体 浓度过低或孵育时间过短 提高抗体浓度，孵育时间不能少于60分钟

试剂超过有效使用期 及时更换试剂

操作中。滴加试剂时缓冲液未沥干。致使试剂稀释 每步骤滴加试剂前吸干切片中多余的缓冲液

复染或衬染太深 复染时要淡染细胞核

室温太低，低于15℃ 适当延长孵育时间

组织经固定和包埋等处理后组织抗原被破坏， 新鲜组织及时固定。防止自溶

残留抗原未被抗体检出

蛋白过度封闭 封闭时间不要超过10分钟


染色阴性的常见问题和解决办法
常见问题 解决办法

操作步骤错误 重新实验，设立阳性对照

组织中无抗原 设立阳性对照实验，以验证实验结果

一抗与二抗种属关系错误 仔细检查一抗与二抗种属关系

试剂盒与显色系统不相匹配 使用与试剂盒相匹配的显色系统

试剂盒中一种或多种试剂活性降低 不同批号试剂盒不能混用，不能使用过期试剂盒