寡核苷酸探针是指用化学合成技术 在体外合成的单链DNA,长度一般为30―50bp。寡核苷酸探针目前均由DNA合成仪合成。
在确定寡核苷酸探针的序列时,一定要使该探针能与靶核酸序列特异性结合,而与无关体外转录法制备tRNA探针原理图序列不会产生杂交反应。如果靶DNA或mRNA的序列是已知的,合成寡核苷酸的序列按照碱基互补原则很容易确定。如果仅仅知道氨基酸序列,探针的设计则较复杂,因为大多数氨基酸可以具有好几种密码子,即密码具有简并性。这时就应该选择密码简并性最小的氨基酸序列。在设计筛选寡核苷酸探针时应遵守以下一些原则:
elisa试剂盒1.长度一般为30~50个bp,过长者杂交时间较长,合成量低,过短者,特异性较差。
2.碱基中(G+C)含量应在40%~60%,超出此范围则会增加非特异性杂交。
3。探针分子内不应存在互补区,否则会出现抑制探针杂交的“发夹”状结构。
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