在elisa试剂盒对洗涤过程不是一个反应步骤，也决定了实验的成功。ELISA试剂盒是由洗涤实现自由与酶结合物分离的目的。通过洗涤以除去板孔不能结合固相的抗原或抗体，以及在非特异性吸附在固相载体扰动的反应过程。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍的，但是在洗涤和应该把干扰物质洗涤下来的非特异性吸附。可以说，在ELISA试剂盒操作，清洗是主要的技术关键，应注意操作者，操作者应严格按要求洗涤，马虎。

在一些试剂仪器配有自动清洗装置的清洗，手工操作，浸泡和水冲式两种，其过程如下：（1）浸泡A.干或干孔反应液；b.洗涤液洗涤（洗涤液再填充板的孔，即甩掉）；c.浸泡，洗涤液填充孔，放置1-2分钟，间歇摇动，浸泡时间不可随意缩短液D.干孔。彻底干燥，可泵或真空泵抽吸，或拒绝在干净的毛巾或吸水纸上拍干液体；e.重复操作的C和D，洗3-4次（或按照提供的说明）。在间接的方法，如底部更高，可以增加洗涤或浸泡时间。

微量滴定板采用浸泡洗涤法。中性缓冲液中含有非离子型洗涤剂洗涤液。结合聚苯乙烯载体蛋白是疏水性的，同时含有疏水基团的非离子型洗涤剂，还含有亲水基团和疏水基团，和由蛋白质的疏水性的键的疏水基团，从而削弱了结合蛋白与固相载体，结合利用亲水基团与水分子，回液状态的蛋白质，是从固相载体分离。在洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20，其浓度在0.05%～0.2%之间，高于0.2%，灵敏度允许包被在固相上的抗原或抗体解吸和减少测试。