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ELISA试剂盒洗涤过程的重要性

点击次数:409 发布时间:2013/9/5 11:56:50
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在elisa试剂盒对洗涤过程不是一个反应步骤,也决定了实验的成功。ELISA试剂盒是由洗涤实现自由与酶结合物分离的目的。通过洗涤以除去板孔不能结合固相的抗原或抗体,以及在非特异性吸附在固相载体扰动的反应过程。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍的,但是在洗涤和应该把干扰物质洗涤下来的非特异性吸附。可以说,在ELISA试剂盒操作,清洗是主要的技术关键,应注意操作者,操作者应严格按要求洗涤,马虎。

在一些试剂仪器配有自动清洗装置的清洗,手工操作,浸泡和水冲式两种,其过程如下:(1)浸泡A.干或干孔反应液;b.洗涤液洗涤(洗涤液再填充板的孔,即甩掉);c.浸泡,洗涤液填充孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短液D.干孔。彻底干燥,可泵或真空泵抽吸,或拒绝在干净的毛巾或吸水纸上拍干液体;e.重复操作的C和D,洗3-4次(或按照提供的说明)。在间接的方法,如底部更高,可以增加洗涤或浸泡时间。

微量滴定板采用浸泡洗涤法。中性缓冲液中含有非离子型洗涤剂洗涤液。结合聚苯乙烯载体蛋白是疏水性的,同时含有疏水基团的非离子型洗涤剂,还含有亲水基团和疏水基团,和由蛋白质的疏水性的键的疏水基团,从而削弱了结合蛋白与固相载体,结合利用亲水基团与水分子,回液状态的蛋白质,是从固相载体分离。在洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20,其浓度在0.05%~0.2%之间,高于0.2%,灵敏度允许包被在固相上的抗原或抗体解吸和减少测试。

原创作者:上海哈灵生物科技有限公司

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