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小分子抗体

小分子抗体包括抗原结合片段（fragmentofantigenbinding，Fab），可变区片段（fragment Of variable，Fv），单链可变区片段（single chain fragment Of variable，ScFv）和单区抗体（singledomainantibody，SdAb）等。

小分子抗体示意图

（一）Fab

Fab片段由H链Pd段和完整L链通过二硫键形成的异二聚体，仅含一个抗原结合位点。用木瓜水解酶消化抗体可获得2个Fab片段。在Fab基因表达时，5，端带上细菌蛋白信号肽基因的Fd基因和L链基因，可在大肠杆菌细胞壁的周质腔内分泌型表达，形成完整的立体折叠和链内、链间二硫键，保持Fab片段的功能。

Fv是由L链和H链V区组成的单价小分子，是与抗原结合的最小功能片段。在Fv的基因工程技术中，可以分别构建含VH和VI。基因的载体，共转染细胞，使之各自表达后组装成功能性Fv分子；或者载体中的VH和VL之间设置终止码，分别表达2个小分子片段。H链和L链的V区可由非共价键结合在一起形成Fv，并能保持特异结合抗原的能力。

（三）ScFv

用适当的寡核苷酸接头将L链和H链的V区连接起来，使之形成单一的多肽链，称为单链抗体（single chainFv，ScFv）。多肽链能自发折叠成天然构象，保持Fv的特异性和亲和力，它的稳定性大大提高了。ScFv中连接DNA（1inkerDNA）的设计原则是DNA接头编码的氨基酸不干扰VH和VL的立体构象和妨碍抗原结合部位，其氨基酸组成应当为亲水性和侧链少，便于折叠和减少抗原性。一般由丝氨酸组成（Gly4Ser）n，它的长度至少含10个氨基酸残基，通常是14或15个氨基酸残基。ScFv的优点是分子量小，免疫原性弱，渗透力强，并可用于药物导向、中和毒素等功能。缺点是无抗体C区，不能介导抗体的其他生物学效应。

（四）SdAb

根据抗体分子的结构，一般将Fv称作抗体的最小单位，但有些更小的亚单位仍具有结合抗原的能力。如单独重链可变区仍可保留与抗原结合的能力，而且保持了完整抗体的特异性，称为单区抗体，它的亲和力低于完整的Fv。单区抗体大小只有完整IgG分子的1／12，故更容易穿入细胞，到达完整抗体不能接近的部位。单区抗体有望作为具有抗原特异性的基本单位，用来构建有效应功能和结合亲和性的抗体。