实验中,我们在复苏细胞时必须遵循快速融化的原则,即必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至 37 ℃,因为这样可使冻存时细胞外的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。
细胞复苏时应注意的事项
1、 取细胞时带好防冻手套和护目镜,避免渗入液氮的冻存管在解冻时由于管中气温的急剧上升而导致的爆炸。
2、 DMSO在常温下对细胞的毒副作用较大,因此,必须在1-2 min内使冻存液完,全融化,复苏过慢会损伤细胞。
3、 离心须加入少量培养液,细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,加入少量培养液可稀释其浓度,减少对细胞的损伤。
4、 水浴锅中不要放入太多冻存管,避免因传热不佳而延长融化时间。牢记更换吸头和吸管,避免细胞交叉污染。
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