NADP。NAD或者NADP作为辅酶参与了细胞生命正常活动中必不可少的氧化还原反应和电子传递。
正常生物体内NAD/NADH比率始终处于一个动态平衡的状态,这个比率是一个可以反映出细胞的氧化还原状态的非常重要的指标,由此可判定一个细胞的新陈代谢活性和细胞的健康与否。在健康的哺乳动物组织中,NAD/NADH的比率大约为700。艾美捷作为致力于为广大的科研机构、高等院校等高端客户提供高端的产品、技术支持与服务的科技公司,特别向您介绍细胞代谢研究的热点领域NAD/NADH比率分析,包括便捷的比色法检测以及更灵敏的荧光法检测等不同的完整研究方案,以满足您不同客户的实验条件。
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产品名称及描述 | 品牌 | 货号 | 产品说明 |
Amplite Fluorimetric NAD/NADH Ratio Assay Kit | AAT | AAT-15263 | 详情 |
NAD/NADH Quantitation Colorimetric Kit | Biovision | K337-100 | 详情 |
NAD+/NADH Cell-Based Assay Kit | Cayman | 600480-1 | 详情 |
Amplite Colorimetric NADH Assay Kit | AAT | AAT-15271 | 详情 |
Amplite Fluorimetric NADH Assay Kit | AAT | AAT-15261 | 详情 |
Amplite Colorimetric Total NAD/NADH Assay Kit | AAT | AAT-15275 | 详情 |
Amplite Fluorimetric Total NAD/NADH Assay Kit | AAT | AAT-15257 | 详情 |
其中Amplite Fluorimetric NAD/NADH Ratio Assay Kit(货号AAT-15263)产品是一款荧光法检测NAD/NADH比率检测试剂盒,具有很高的灵敏度。该检测方法因为是在红色可见光范围内,能够显著地降低来自生物样品本身的干扰。本检测法显现出高灵敏度和干扰小,在570nm处激发,发射光在590nm处,且能分别检测出NAD、NADH和NAD/NADH比率。;而NAD/NADH Quantitation Colorimetric Kit(货号K337-100)则是一款比色法检测试剂盒,方便绝大多数实验室使用,且操作方便,快捷。为您推荐的上述两款试剂盒,均能检测NAD、NADH以及NAD/NADH比率三个数据,具有无与伦比的性价比,绝对超值!实验操作简单,便捷,灵敏,特异性高,不与NADP发生交叉反应。
如果您希望进行较多样本的高通量分析,或者希望直接在96孔细胞培养板上进行检测,NAD+/NADH Cell-Based Assay Kit(货号600480-1)则是合适的选择。该试剂盒是将细胞培养在96孔板中,基于比色法于96孔板中完成整套实验,最终得到NAD/NADH的比值。整个实验操作简单,尤其适用于高通量研究。稍显遗憾的是,该试剂盒只能检测NAD/NADH比率。 另外,艾美捷还向您推荐单独检测NADH,以及检测总NAD/NADH的检测试剂盒,同样适用于比色法和荧光法,方便您根据自己的需求选择合适的检测方案。
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产品名称及描述 | 品牌 | 货号 | 产品说明 |
Amplite Fluorimetric NAD/NADH Ratio Assay Kit | AAT | AAT-15263 | 详情 |
NAD/NADH Quantitation Colorimetric Kit | Biovision | K337-100 | 详情 |
NAD+/NADH Cell-Based Assay Kit | Cayman | 600480-1 | 详情 |
Amplite Colorimetric NADH Assay Kit | AAT | AAT-15271 | 详情 |
Amplite Fluorimetric NADH Assay Kit | AAT | AAT-15261 | 详情 |
Amplite Colorimetric Total NAD and NADH Assay Kit | AAT | AAT-15275 | 详情 |
Amplite Fluorimetric Total NAD and NADH Assay Kit | AAT | AAT-15257 | 详情 |
除了NAD/NADH定量与比率分析试剂盒外,艾美捷还向您推荐其它商业化的试剂盒产品,包括NADP/NADPH定量及比率分析,以及其它涉及葡萄糖代谢、糖酵解途径、丙酮酸代谢、乳酸代谢等其它细胞代谢的相关分析试剂盒,为客户的科研加油助力!
艾美捷能为您寻找并提供最优的产品解决方案!包括检测各种检测分析试剂盒、相关特色抗体、重组蛋白及细胞因子和酶等多种产品,以及其他创新的研究工具。其产品覆盖细胞凋亡研究、能量代谢、细胞/组织蛋白提取、氧化应激与损伤、代谢与肥胖症、细胞增殖与毒性、信号转导、干细胞研究等领域。艾美捷致力于研究者们提供最好、最新的细胞生物学研究工具而不断扩大产品及服务质量。如果您对上述产品感兴趣,请致电免费客户专线到艾美捷科技有限公司垂询相关的产品信息及完整实验解决方案。
武汉艾美捷科技有限公司(Amyjet Scientific Inc)
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数量:大量保质期:一年保存条件:常温保存规格:250 T
酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。过氧化氢定量分析试剂盒(水兼容性)传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出,表达量则常常超过大肠杆菌系统,如果实现高效分泌表达,则纯化成本非常低,具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。
过氧化氢定量分析试剂盒(水兼容性)除了用于规模化生产重组蛋白之外,毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用,比如表达蛋白用于结构分析,信号传导途径研究,当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少,一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。
如果需要,完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索,从以往的战绩来看,毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了,过氧化氢定量分析试剂盒(水兼容性)比例也很高,虽然仍存在风险。
1)原核诱导时间,从你的结果来看,诱导1-5小时变化不大,时间点影响较小,取3小时没有问题。很多情况下,温度对可溶性影响较大,不知道你30度诱导的可溶性如何?如果蛋白主要是可溶性的,那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体,过氧化氢定量分析试剂盒(水兼容性)倒是可以再降低一下诱导温度。此外,很多蛋白包含体复性后有活性,如果可溶性表达困难或表达量太低,仍可以考虑包含体复性策略。
2)酵母细胞的破壁可以采用机械法,也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨,主要用于中试和生产,但有的仪器也可以兼顾实验室规模,这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体,是一种外源基因高效转化的方法,过氧化氢定量分析试剂盒(水兼容性)但用于破壁检测表达则成本太高,此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献,是小量裂截用于表达检测的,我没有直接作过,但我们实验室的研究生反映还可以。
DL marker系列
ZM402-1DL15000(条带:250.1000.2500.5000.7500.10000.15000)50TZOMANBIO
ZM402-2DL15000(条带:250.1000.2500.5000.7500.10000.15000)500TZOMANBIO
ZM403-1DL15000 Plus(条带250.500.1000.1500.2500.4000.5000.7500.10000.15000)50TZOMANBIO
ZM403-2DL15000 Plus (条带250.500.1000.1500.2500.4000.5000.7500.10000.15000)500TZOMANBIO
ZM404-1DL2000(条带100.250.500.750.1000.2000)50TZOMANBIO
ZM404-2DL2000(条带100.250.500.750.1000.2000)1000TZOMANBIO
ZM405-1DL2000 Plus (条带100.250.500.750.1000.2000.3000.5000)50TZOMANBIO
ZM405-2DL2000 Plus (条带100.250.500.750.1000.2000.3000.5000)500TZOMANBIO
酶切类marker系列
牛乳铁传递蛋白(LF/LTF)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定牛血清,血浆及相关液体样本中乳铁传递蛋白(LF/LTF)的含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛乳铁传递蛋白(LF/LTF)水平。用纯化的牛乳铁传递蛋白(LF/LTF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入乳铁传递蛋白(LF/LTF)再与HRP标记的乳铁传递蛋白(LF/LTF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的乳铁传递蛋白(LF/LTF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中牛乳铁传递蛋白(LF/LTF)浓度。
试剂盒组成:
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| (20ml×20倍)×1瓶 | | |
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1500μg/L,1000μg/L ,500μg/L,250μg/L, 125μg/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,
在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释
倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值
代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释
倍数,即为样品的实际浓度。
(此图仅供参考)
试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批间应分别小于9%和11%
检测范围:
100μg/L -2000μg/L
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
6 ng/L -180ng/L
人1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3)酶联免疫分析试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3)水平。用纯化的人1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3),再与HRP标记的1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3)浓度。
人1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3)酶联免疫分析试剂盒试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(320 ng/L) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
人1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3)酶联免疫分析试剂盒操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
160 ng/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
80 ng/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
40 ng/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
20 ng/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
10 ng/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
小鼠肌酸激酶(CK)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用(010-57269780 QQ:1261299569联系人:刘经理) 预期应用ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中肌酸激酶(CK)含量。 实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗CK抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗CK抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的CK呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板:一块(96孔) 2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为400 U/L,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释400 U/L,200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,样品稀释液直接作为标准浓度0 U/L,临用前15分钟内配制。如配制200 U/L标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)400 U/L的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100ul),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。11. 覆膜:1×5张
特异性 本试剂盒可同时检测重组或天然的小鼠肌酸激酶(CK),且与其它相关蛋白无交叉反应。
计算 以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线(推荐使用专业制作曲线软件进行分析,如curve expert 1.3),根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项1. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。2. 一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。3. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。4. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。5. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。6. 底物请避光保存。
检测范围:6.25 U/L - 400 U/L
最低检测限:1.56 U/L
说明 1. 在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。2. 小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且,洗涤不充分将影响试验结果。3. 试剂盒保存:部分试剂保存于-20℃,部分试剂保存于2-8℃,具体以标签上的标示为准。4. 浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。 5. 刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。 6. 中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。7. 所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。8. 有效期:6个月
本公司Elisa试剂盒可以更加、而实用。Elisa试剂盒 具有以下特点:灵敏性高、特异性强、重复性好 欢迎您来电了解详情!
小鼠谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)的含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)水平。用纯化的小鼠谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入谷胱甘肽-过氧化物酶,再与HRP标记的GSH-PX抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽-过氧化物酶呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)的含量。
试剂盒组成:
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| (20ml×20倍)×1瓶 | | |
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在、第二孔中分别加标准品100μl,然后在、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为600U/L,400 U/L ,200 U/L,100 U/L,50 U/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,
在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释
倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值
代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释
倍数,即为样品的实际浓度。
(此图仅供参考)
试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
检测范围:
15U/L -700 U/L
保存条件及期:
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.期:6个月
货号:JW-S51364
规格:5次
检测样本:动物和人相关组织样本
保存条件:低温保存
库存数量:大量
品牌:极威生物
供应商:上海极威生物科技有限公司
温馨提示:不可用于临床治疗
植物葡萄糖6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase;GPI)电泳分析试剂盒订购事项:
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注:本产品仅供科研使用,不得用于其他用途,禁止用于临床。
植物葡萄糖6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase;GPI)电泳分析试剂盒及极威生物长期供应产品种类:
长期为广大高校及医院等科研单位供应各类产品试剂,产品种类齐全,包括:elisa试剂盒,细胞株,标准品,生物试剂,蛋白分子类,免疫学类,生物化学类,其中生物化学技术相关试剂类别如下:ATP酶活性定量试剂专题、甲戊二羟酸(MEVALONATE)通路分析试剂专题、乙酰化分析试剂专题、组织生物化学成分定量检测试剂专题、脂类成分定量检测试剂专题、金属元素定量检测试剂专题、脂肪酸β氧化检测试剂专题、脂类代谢检测试剂专题、胶原蛋白(collagen)代谢检测试剂专题、PH检测试剂专题等
极威生物产品使用承诺
上海极威生物有限公司秉着“极致追求,科学权威,客户满意,质量承诺”的宗旨为我们的广大科研用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
植物葡萄糖6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase;GPI)电泳分析试剂盒及其他产品目录信息
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