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保存:2-8℃主要用途:科研检测种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
人淋巴细胞因子Elisa试剂盒厂家,苏州宁波
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人淋巴细胞因子ELISA试剂盒 江莱生物提供免费代测服务,一周内出结果,保证质量,欢迎订购!人淋巴细胞因子elisa试剂盒 Human lymphocyte factor ELISA Kit
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人淋巴细胞因子ELISA试剂盒 Human lymphocyte factor ELISA Kit
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍然保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,所以可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
人淋巴细胞因子ELISA试剂盒 Human lymphocyte factor ELISA Kit
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人淋巴细胞因子ELISA试剂盒产品信息:
英文名称:Human lymphocyte factor ELISA Kit
产品货号:SBJ-H0389
品牌:森贝伽
产品规格:96T/48T
保存:2-8℃,避光保存
库存状态:现货供应
有效期:六个月
注:仅用于科研,不得用于临床诊断
人淋巴细胞因子ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法:
1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人淋巴细胞因子ELISA试剂盒操作注意事项:
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8.按照试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
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【产品名称】:人淋巴细胞因子elisa试剂盒供应
【英文名称】:Human lymphocyte factor elisa Kit
【检测种属】:大鼠等动植物。
【产品用途】:被测样品定性或定量分析
【产品规格】:48T
【检测方法】:酶免法/酶联免疫法(ELISA)
【保存条件】:2-8℃
【供 货 期】:1-3天(现货供应)
【产品性状】:液体盒装
【服务优势】:全程提供ELISA实验技术指导和elisa试剂盒免费代测
【样本储存】:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
人淋巴细胞因子elisa试剂盒供应洗涤方法:
1. 自动洗板机:每孔加入洗涤液350μl,注入与吸出间隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩尽孔内液体,在洁净的吸水纸上拍干,每孔加洗涤液350μl,浸泡1-2分钟,吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。
实验开始前,各试剂均应平衡至室温;试剂或样品配制时,均需充分混匀,并尽量避免起泡。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜,37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育1小时。
3.弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育1小时。
5.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。
7.每孔加终止液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。
9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。本公司专业经销人淋巴细胞因子elisa试剂盒供应长期为全国科研机构、高校和科研人员提供优质产品,在保证产品质量的同时,我们还配有扎实的售后技术咨询和服务,欢迎来电咨询。
人淋巴细胞因子ELISA试剂盒 上海抚生专门提供各种ELISA试剂盒 ,各种标本、种属、具体指标齐全。规格:48孔/96孔保存:2-8°方法:elisa货期:现货人淋巴细胞因子ELISA试剂盒 ELISA试剂盒所需要样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右 (2000-3000转/分)去除颗粒。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清 。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。上海抚生公司推荐相关类别产品信息:人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA试剂盒人庚型肝炎病毒IgM(HGV-IgM)ELISA试剂盒人输血传播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA试剂盒人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA试剂盒人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA试剂盒人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA试剂盒人丁型肝炎IgG(HDV IgG)ELISA试剂盒人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA试剂盒人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA试剂盒人糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒人促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)ELISA试剂盒 人去氨加压素/1-去氨基-8-右旋-精氨酸加压素(dDAVP)ELISA试剂盒人毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M3(M-AChR M3)ELISA试剂盒人睾酮受体(TR)ELISA试剂盒人毒蕈碱型乙酰胆碱受体(M-AChR)ELISA试剂盒 人淋巴细胞因子ELISA试剂盒 注意:本产品只供科研使用,不用于临床诊断,详情请来电咨询。
人淋巴细胞因子elisa试剂盒
注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,
在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释
倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值
代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释
倍数,即为样品的实际浓度。
试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R 值为0.92 以上。
2.批内与批见应分别小于9%和15%
检测范围:
3pg/ml -100pg/ml
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月
| 人B细胞生长因子(BCGF)ELISA试剂盒 |
| 人B细胞分化因子(BCDF)ELISA试剂盒 |
| 人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA试剂盒 |
| 人可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒 |
| 人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒 |
| 人可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA试剂盒 |
| 人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA试剂盒 |
| 人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒 |
| 人多效生长因子(PTN)ELISA试剂盒 |
| 人可溶性CD28(sCD28)ELISA试剂盒 |
| 人淋巴细胞因子ELISA试剂盒 |
| 人胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA试剂盒 |
| 人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA试剂盒 |
| 人神经保护因子(CVNPF)ELISA试剂盒 |
| 人可溶性肿瘤坏死因子α受体(sTNFαR)ELISA试剂盒 |
| 人可溶性细胞因子受体(sCKR)ELISA试剂盒 |
| 人可溶性凋亡相关因子配体(sFASL)ELISA试剂盒 |
| 人细胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA试剂盒 |
| 人集落刺激因子(CSF)ELISA试剂盒 |
| 人γ干扰素诱导单核细胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA试剂盒 |
| 人干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)ELISA试剂盒 |
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人淋巴细胞因子elisa试剂盒参数:
| 编号 | 中文名称 | 英文名称 | 规格 |
| F2569-A | 人淋巴细胞因子elisa试剂盒 | Human lymphocyte factor elisa Kit | 48T |
| 编号 | 中文名称 | 英文名称 | 规格 |
| F2569-A | 人淋巴细胞因子elisa试剂盒 | Human lymphocyte factor elisa Kit | 48T |
人淋巴细胞因子elisa试剂盒广泛应用在免疫学检验的各领域中,我们来介绍一下更简便的操作说明,编号:F2569-A,英文名称Human lymphocyte factor elisa Kit
1、人淋巴细胞因子elisa试剂盒操作方法一用于检测未知抗原的双抗体夹心法:(1).包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 (2).加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 (3).加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 (4).加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 (5).终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 (6).结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
2、人淋巴细胞因子elisa试剂盒操作方法二:用于检测未知抗体的间接法: (1).用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。 (2).加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)(3).于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。 (4).于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟 (5).于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml (6).可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 ELISA是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法,由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素,以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测,既可以做定性试验也可以做定量分析等优点,已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。
3、临床标本的收集和保存 用于ELISA测定的临床标本最为常用的是血清(浆),有时因为特定的检测目的,也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前临床上使用血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和治疗药物等。对用于激素和治疗药物测定的血清标本的收集,要注意收集时间甚或体位有可能会对测定结果产生影响。如可的松在早晨4~6点之间,会有一峰值出现:生长激素、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以阵发性方式释放,因此,在测定此类激素时,有必要在密切相连的时间间隔内采取数份血样本,以其中间值为测定值。又如当从卧位变为站立位时,血清中肾素活性将出现明显增高。再如治疗药物的检测,应根据药代动力学选择服药后的最适时间抽血检测。用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物和特种蛋白等的检测的血清标本的收集则没有时间和体位方面的影响,只是在处理和保存方面要考虑。
(1)要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。(2)样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。(3)血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。(4)冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。(5)标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。
4、试剂准备 在临床实验室,对试剂准备一般不太注意,通常的做法是,在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是,在实验开始前,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20分钟以上后,再进行测定,以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的,主要是为了在后面的温育反应步骤中,能使反应微孔内的温度能较快地达到所要求的高度,以满足测定要求。其次,目前的商品ELISA试剂盒中的洗板液均需在实验室使用时对所提供的浓缩液稀释配制,因此稀释时所用的蒸馏水或去离子水应保证质量。此外,当试剂盒以OPD为底物时,则底物溶液应在反应显色前临时配制。

在现在的ELISA商品试剂盒中,血清样本的加入几乎是唯一的要使用微量加样器加入样本的步骤。使用微量加样器加样必须注意的关键点是:加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。
四、温育温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比,即温度越高,则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温,其次是43℃和2~8℃。温育这一步是临床ELISA测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟~1小时,进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1~2小时才能有较完全的结合,低于1小时,可能会影响测定下限。因此,关于温育,在实际测定操作中一定要注意以下几点:要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说,加完样本和/或反应试剂后,将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时,孔内温度从室温升至37℃,需要一定的时间,尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下,这段升温时间可能还比较长,而在临床实验室中,很少有人注意这个问题,通常是将微孔板一放入温箱即开始计时,这样就很容易造成实际测定中温育时间不够,弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题,就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间,在做HBsAg测定的室内质控中,测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时,总是测不出来,不知原因为何?这可能就与南方冬天室内温度较低有关,此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够,以致弱阳性样本测定为阴性。因此,为保证37℃下足够的温育时间,临床实验室可自行确定本实验室不同季节(不同室温下)微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃,从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是,用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。
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