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SARS-CoV-2 M蛋白基因质粒
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详细内容
SARS-CoV-2 M基因质粒是我公司推出的哺乳动物细胞表达质粒,用于表达C端带有Myc标签的新冠病毒M蛋白,可以使用抗Myc标签的抗体来识别M蛋白的表达,或进行免疫共沉淀分析等。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达,质粒为氨苄青霉素抗性。

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| SARS-CoV-2 M蛋白基因质粒 | SARS-CoV-2 M gene plasmid | 1μg|100μg |
M蛋白是冠状病毒四个结构蛋白之一,由M基因编码,含有3个跨膜结构域和一个保守结构域。M蛋白是一种跨膜糖蛋白(membrane glycoprotein),大部分结构陷于膜内。M蛋白N-端亲水性末端突出于膜的外表面,C-端亲水区位于病毒粒子内部,能与病毒衣壳相互作用。M蛋白主要参与病毒组装,促进膜弯曲(curvature)以及结合至核衣壳(nucleocapsid)上。M蛋白的保守结构域对于病毒装配非常重要,主要通过M-M、M-S和M-N蛋白相互作用,参与病毒复制装配和出芽。此外,SARS-CoV M蛋白还能抑制I型干扰素的产生。
使用说明:
次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
荧光镓试剂(>98.0%(T))质量规格:>98.0%(T)Lumogallion 人糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA检测试剂盒Humancarbohydrate-deficieansferrin,CDTELISAKit 96T/48T HumanCyclinDependeKinase5,CDK5ELISA试剂盒人周期素依赖性激酶5(CDK5)ELISA试剂盒规格:96T/48T
浴酮灵二磺酸二钠盐质量规格:用于血液中铜的测定Di Bathocuproinedisulfonate 大鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)试剂盒 Rat terminal compleme complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit Humanglucocoicoidreceptor-α,GR-αELISAKit人糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA试剂盒规格:96T/48T
水合红菲绕啉二磺酸钠水合物质量规格:用于亚铁离子的测定Bathophenanthrolinedisulfonic Acid Di Salt Hydrate 英文名称Ratai-melanocyteELISAKit大鼠色素细胞抗体(melanocyte)规格:96T/48T 鸡乙酰乙酸检测(ACAC)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
浴铜灵 (升华提)(>99.0%(HPLC)(T))质量规格:>99.0%(HPLC)(T)Bathocuproine (purified by sublimation) 酵母菌YPD培养基500毫升 人载脂蛋白B48(apo-B48)试剂盒 Human Apolipoprotein B48,apo-B48 ELISA Kit
载玻片细胞蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒-LEPTIN10/20 3621-38-3药根碱规格 Jatrorrhizine
MouseADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9ELISA试剂盒小鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒规格:96T/48T 315-22-0野百合碱厂家 Crotaline
小鼠整合素α3(ITGα3)ELISA试剂盒 ,英文名: ITGα3 ELISA Kit 27740-01-8野黄芩苷说明书 Scutellarin
热休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA检测试剂盒MonkeyHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit 96T/48T 529-53-3野黄芩素品牌 Scutellarein
犬内皮素1(ET-1)试剂盒 Dog Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit 877822-41-8野马追内酯A规格 Eupalinolide A
SARS-CoV-2 M蛋白基因质粒28-去甲基-β-香树脂酮厂家 28-demethyl -β-amyrone 英文名称Ratα1-AcidglycoproteinELISAKit大鼠α1-酸性糖蛋白(α1-AGP)规格:96T/48T
28978-02-1大蓟苷厂家 Pectolinarin 英文名称Ratα1-AcidglycoproteinELISAKit大鼠α1-酸性糖蛋白(α1-AGP)规格:96T/48T
28957-04-2冬凌草甲素说明书 Oridonin 英文名称RatVWFELISAKit大鼠血管性血友病因子(VWF)规格:96T/48T
28831-65-4紫草酸规格 lithospermic acid 英文名称RatVWFELISAKit大鼠血管性血友病因子(VWF)规格:96T/48T
28831-65-4紫草酸规格 Lithospermic acid 英文名称RatVitaminCELISAKit大鼠维生素C(VC)规格:96T/48T
热门标签:SARS-CoV-2,M蛋白基因质粒













