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JM109感受态细胞
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 9:52:30
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详细内容
本公司生产的JM109感受态细胞是采用JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108，⁻⁷0℃保存几个月转化效率不发生改变。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| JM109感受态细胞 | E.coli JM109 Competent Cells | 10×100μl|20×100μl |
基因型：recA supE44 endA1 hsdR17 gyrA96relA1 thi Δ(lac-proAB) F’[traD36 proAB+ lacIq lacZΔM15]
特 点：一种琥珀抑制型F’重组缺陷菌株。支持M13载体的生长，对转染的DNA有修饰作用，但无限制作用。该菌株中的F’带有lacZΔM15，后者使得与在λZAP中编码的β-半乳糖苷酶氨基端进行α-互补，可用于蓝白斑筛选。
操作方法：（以下各步骤均为无菌操作）
1、将感受态细胞置于冰上融化，以下实验以100μl感受态细胞为例。
2、向感受态细胞悬液中加入需转化的目的DNA，注意目的DNA的体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一，轻轻旋转离心管以混匀内容物，冰浴放置30分钟。
3、将离心管置于42℃水浴中放置60-90，然后快速转移到冰浴中放置2-3分钟，注意不要摇动离心管。
4、向离心管中加入500ul无菌无抗的SOC或LB培养基，37℃ 180rpm振荡培养1小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5、取适量已转化的感受态细胞涂布含相应抗生素的SOC或LB平板，37℃倒置培养12-16小时。涂布用量可根据具体实验来调整，如转化的DNA总量较多，可取100μl左右转化产物涂板；反之，如果转化的DNA总量较少，可取200～300μl的转化产物涂板。过多菌液可以抑制细菌生长。如果预计的克隆较少，可通过离心后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。涂布剩余的菌液可4℃保存，如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的平板。
注意事项：
1、收到感受态细胞应保存在⁻⁷0℃，不可反复冻融，否则其转化效率将会降低。
2、实验过程中应严格无菌操作，防止其它DNA的污染，避免为以后的筛选、鉴定带来影响。
3、转化时，转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比，但当加入的外源DNA量过多或体积过大反而会降低转化效率。转化时DNA体积要小于感受态细胞体积的十分之一。
4、转化率的计算：转化率＝产生菌落的总数/铺板DNA总量
5、为防止转化实验不成功，可以保留部分连接产物，以重新转化，将损失将到低。
储存条件：⁻⁷0℃保存，必须加干冰运输。自收货之日起液氮保存至少一年，⁻⁷0℃保存至少6个月。
晕苯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)Coronene ELISAKitFK人趋化因子规格：48T/96T 大鼠白介素33(IL-33)试剂盒 Rat Ierleukin 33,IL-33 ELISA Kit
晕苯(升华提)(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)Coronene (purified by sublimation) 小鼠白介素13(IL-13)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-13 ELISA Kit CLIAKitfoGF-Alpha(MouseansforminggrowthfactorAlpha)ELISAKit小鼠转化生长因子α规格：48T/96T
心环烯(>97.0%(GC))质量规格：>97.0%(GC)Corannulene 大鼠白细胞分化抗原30(CD30)ELISA检测试剂盒RatClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit 96T/48T 染色质共沉淀分析(CHIP)20样本
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超氧化物歧化酶(SOD)细菌裂解样品制备试剂盒50 528-58-5氯化矢车菊素规格 Cyanidin Chloride
Ratgrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISA试剂盒大鼠生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA试剂盒规格：96T/48T 6681-18-1氯化木兰花碱厂家 Magnoflorine chloride
小鼠肿廇蛋白P63(TP63)ELISA试剂盒 ，英文名： TP63 ELISA Kit 88901-36-4罗汉果皂苷V说明书 Mogroside Ⅴ
犬白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA检测试剂盒CanineIerleukin-8,IL-8ELISAKit 96T/48T 10097-84-4罗通定品牌 Rotundine
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JM109感受态细胞524-30-1秦皮苷规格 Fraxin 猪Ⅲ型胶原氨基端肽(PⅢ)ELISA检测试剂盒PorcineprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit 96T/48T
524-17-4蝙蝠葛碱说明书 Dauricine 猪(NO)试剂盒 Pig niic oxide,NO ELISA Kit
524-17-4蝙蝠葛碱厂家 Dauricine 重组腺病毒载体转染试剂盒10
524-12-9蟛蜞菊内酯说明书 Wedelolactone 重组腺病毒效价溶斑测定试剂盒20
524-12-9蟛蜞菊内酯规格 Wedelolactone 重组腺病毒包装试剂盒1套
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
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