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DH5α受体菌
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详细内容
本制品是一种用于铺制平板培养质粒和hsd R 17 rec A 1 end A 1gyr A 96 thi - 1 rel A 1粘粒的重组缺陷琥珀抑制型菌株。其中φ80lac Z Δ M15突变可与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补,可用于蓝白斑筛选。

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| DH5α受体菌 |
| 1ml发货周期:1~3天 |
储存条件:⁻⁷0℃可长期保存,-20℃可保存一年。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
芸苔素内酯(标准品)Brassinolide质量规格:分析标准品 小鼠丝酸/苏酸蛋酸酶(STK)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 ELISAKitOPGL小鼠骨保护素配体规格:48T/96T
啶虫脒(标准品)Acetamiprid质量规格:分析标准品 Rat myosin (Myosin) ELISA Kit 大鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA试剂盒 Humanaconitase2,ACO-2ELISAKit人乌头酸酶2(ACO-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
甲巯咪唑(标准品)Methimazole质量规格:含量测定 Humanneuraminidase,NAELISAKit 人神经氨酸酶(NA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 人抗甲状腺微粒体抗体(ATMA/TMAB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
枸橼酸氯米芬(标准品)Clomiphene 质量规格:含量测定 Duckai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2ELISA试剂盒鸭抗凝血素抗体(aPT1/aPT2)ELISA试剂盒规格:96T/48T 小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)试剂盒 Mouse Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA kit
小鼠周期素依赖性激酶8(CDK8)ELISA试剂盒 ,英文名: CDK8 ELISA Kit 62-46-4硫辛酸说明书 Lipoic acid
犬维生素E(VE)ELISA检测试剂盒CanineVitaminE,VEELISAKit 96T/48T 20831⁻⁷6-9龙胆苦苷品牌 Gentiopicroside
犬透明质酸(HA)试剂盒 Canine Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 153-18-4芦丁规格 Rutin
英文名称HumaumornecrosisfactorαELISAKIT人肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISAKIT规格:96T/48T 481⁻⁷2-1芦荟大黄素厂家 Aloeemodin
超氧化物歧化酶(SOD)细胞裂解样品制备试剂盒50 1415⁻⁷3-2芦荟苷说明书 Aloin
DH5α受体菌529-44-2杨梅素厂家 Myricetin 猪坏死因子α(TNF-α)试剂盒 Porcine TNF-α ELISA Kit
5289⁻⁷4⁻⁷蜕皮激素厂家 Ecdysterone 猪坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒Porcinetumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 96T/48T
528-58-5氯化矢车菊素规格 Cyanidin Chloride 猪凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA检测试剂盒PorcineFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit 96T/48T
528-48-3漆黄素品牌 Fisetin 猪单核细胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA检测试剂盒PorcinelisteriolysinELISAKit 96T/48T
528-43-8厚朴酚规格 Magnolol 猪肠三叶因子(ITF)ELISA检测试剂盒PorcineIestinalefoilfactor,ITFELISAKit 96T/48T
热门标签:DH5α受体菌













