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BL21 plysS感受态细胞
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详细内容
本制品是采用BL21(DE3)pLysS菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达107,⁻⁷0℃保存几个月转化效率不发生改变。每支感受态可以酌情分装使用,降低了实验的成本。质量稳定,使用方便,质优价廉。

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| BL21 plysS感受态细胞 | BL21 plysS Competent E.coli | 100 μl×10 |
该菌株带有质粒pLysS,具有氯霉素抗性。此质粒含有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达。适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。
基因型:F- ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm(DE3)pLysS Camr
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
皂土(膨润土)(Bentone SD-1,适于中至低性溶剂)Bentonite质量规格:Bentone SD-1,适于中至低性溶剂 小鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒 ,英文名: cath-K ELISA Kit 组织样品细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒20
皂土(膨润土)(Bentone SD-2,适于中高性溶剂)Bentonite质量规格:Bentone SD-2,适于中高性溶剂 小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA检测试剂盒Mousethrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit 96T/48T Humanheat-labileeerotoxinBsubunit,LTBELISAKit人不耐热肠B亚单位(LTB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
活性炭粉(AR,200目,粉末状,褐色)Activated charcoal质量规格:AR,200目,粉末状,褐色 人抗氨酰NA合成酶,线粒体(AARS2)抗体试剂盒 Human ai alanyl-NA syhetase,mitochondrial(AARS2)aibody ELISA kit 人血管紧张素Ⅰ受体抗体(ANG-ⅠR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
活性炭(CP,200目,粉末状,褐色)Activated charcoal质量规格:CP,200目,粉末状,褐色 rabbittissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit兔子基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T 猪热休克蛋白70kDa蛋白1A(HSPA1A)试剂盒 Pig Heat shock 70 kDa protein 1A,HSPA1A ELISA kit
IL-1βELISA试剂盒鱼类白介素1β规格:96T/48T 30220-46-3巨大戟醇厂家 Ingenol
小鼠主要碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒 ,英文名: MBP ELISA Kit 42719-32-4具栖冬青苷说明书 Pedunculoside
犬三甲状腺原氨酸(T3)ELISA检测试剂盒Caninei-iodothyronine,T3ELISAKit 96T/48T 331-39-5咖啡酸品牌 Caffeic acid
犬透明质酸酶4(HAase 4)试剂盒 Canine Hyaluronidase 4,HAase 4 ELISA Kit 117076-54-53’-羟基葛根素规格 3'-hydroxy Puerarin
英文名称HumaumornecrosisfactorsolublereceptorⅠELISAKIT人肿瘤坏死因子可溶性受体I(TNFsRI)规格:96T/48T 3-羟基巴戟醌厂家 3-Hydroxy- morindone
BL21 plysS感受态细胞546-97-4古伦宾规格 Columbin 猪细胞间粘附分子2(ICAM-2)试剂盒 Porcine iercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit
546-43-0土木香内酯规格 Alantolactone 猪戊糖素(PE)试剂盒 Pig peosidine,PE ELISA kit
545-47-1羽扇豆醇品牌 Lupeol 抗体试剂盒 Classical Swine Fever Virus Aibody ELISA Kit
545-47-1羽扇豆醇规格 Lupeol 抗体(IgM)试剂盒 Pig Ai-CSFV Aibody IgM ELISA Kit
54522-53-1甲基原纤细薯蓣皂苷规格 Methyl protogracillin 抗体(IgG)试剂盒 Classical Swine Fever Virus Aibody IgG ELISA Kit
热门标签:BL21,plysS感受态细胞













