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BL21(DE3)感受态细胞(pG-KJE8分子伴侣)
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 9:52:30
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详细内容
外源蛋白质在中的表达常形成包涵体或发生蛋白酶降解。大多是由于所表达的蛋白未能正确折叠造成。分子伴侣协同作用，可以帮助外源蛋白正确折叠。不同外源蛋白需要的分子伴侣不同。百奥莱博提供5种表达常用分子伴侣的BL21(DE3)衍生菌株，适用于不同外源蛋白在中有效折叠。该系统适用于pET系列等依赖T7启动子的表达载体。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| BL21(DE3)感受态细胞(pG-KJE8分子伴侣) | Chaperone competent cells pG-KJE8/BL21(DE3) | 100μl×10 |
泽泻醇C-23-醋酸酯;泽泻醇C单乙酸酯质量规格：HPLC≥98%，标准品Alisol C monoacetate 英文名称MouseHeatShockProtein20ELISAKit小鼠热休克蛋白20(HSP20)规格：96T/48T 大鼠脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)ELISA试剂盒 ，英文名： FABP4 ELISA Kit
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载玻片细胞INSULIN蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20 77-60-1剑麻皂苷元说明书 Tigogenin
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BL21(DE3)感受态细胞(pG-KJE8分子伴侣)552-66-9大豆苷品牌 Daidzin 猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1)试剂盒 Porcine Vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA Kit
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552-59-0樱黄素厂家 Prunetin 猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)试剂盒 Pig Vascular Endothelial-Cadherin Complex,VE-cad ELISA Kit
552-58-9圣草酚说明书 Eriodictyol 猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA检测试剂盒PorcineVascularEndothelial-CadherinComplex,VE-cadELISAKit 96T/48T
552-58-9圣草酚说明书 Eriodictyol 猪血管紧张素转化酶2(ACE2)试剂盒 Pig Angiotensin conveing enzyme 2,ACE2 ELISA Kit
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
热门标签：BL21(DE3)感受态细胞(pG-KJE8分子伴侣)
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