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BJ5183电击感受态细胞
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 9:52:30
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详细内容
BJ5183是一种具有较高重组活力的菌株，是目腺病毒系统常用的感受态细胞。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| BJ5183电击感受态细胞 | BJ5183 Electroporation-Competent Cell | 5×50μl|20×50μl |
BJ5183菌株含有sbcBCrecBC双重突变，赋予BJ5183细胞较强的重组能力，有利于转入的目的基因与腺病毒质粒{pAdeasy-1[encodes the Adenovirus-5 genome(E1/E3 deleted)]或pAdeasy-2[encodes the Adenovirus-5 genome(E1/E3/E4 deleted)]}的重组。endA1(缺失核酸内切酶)的突变有利于重组DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。Strr赋予BJ5183菌株链霉素抗性。
BJ5183电击感受态细胞适用于普通质粒和大质粒的构建，经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>1010cfu/μg DNA。
保存条件：-80℃
BJ5183是一种具有较高重组活力的菌株，是目腺病毒系统常用的感受态细胞。
BJ5183菌株含有sbcBCrecBC双重突变，赋予BJ5183细胞较强的重组能力，有利于转入的目的基因与腺病毒质粒{pAdeasy-1[encodes the Adenovirus-5 genome(E1/E3 deleted)]或pAdeasy-2[encodes the Adenovirus-5 genome(E1/E3/E4 deleted)]}的重组。endA1(缺失核酸内切酶)的突变有利于重组DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。Strr赋予BJ5183菌株链霉素抗性。
BJ5183电击感受态细胞适用于普通质粒和大质粒的构建，经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>1010cfu/μg DNA。
保存条件：-80℃
SURE电击感受态细胞只能用于电击转化，不能用于热激转化。真核生物DNA存在较多“十字型”、“Z 字型”等二或三结构，这种DNA结构在利用传统进行克隆时易被体内的重组酶系统或其他防御系统识别并对其进行重组，删除等破坏，导致很难对这类DNA进行正确的克隆操作。SURE菌株可以解决这些问题：此菌株体内重组酶系统整条通路被破坏，并且(mcrA-，mcrCB-，mcrF-，mrr-，hsdR-)这些限制性突变的存在赋予此菌株无法对外源DNA进行标记、限制，提高了外源甲基化DNA的克隆效率，同时具有核酸酶(endA)突变、重组酶(recB recJ)突变，增强了外源DNA的稳定性。存在于F´因子上的lacIqZΔM15基因使此菌株可以进行蓝白斑筛选；KanR，TetR赋予菌株卡那霉素和四环素抗性。
SURE电击感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>0.5×1010 cfu/μg DNA。
保存条件：-80℃
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
紫丁香酚苷（标准品）Syringin质量规格：HPLC≥98%，标准品 犬抑制素β-B(Inhbb)试剂盒 Canine inhibin beta-B,Inhbb ELISA Kit 人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
竹节参皂苷IVa（标准品）chikusetsu saponin Iva质量规格：供含量测定用 英文名称MouseBTCELISAKit小鼠BTCELISAKit规格：96T/48T 猪生长激素受体(GHR)试剂盒 Pig growth hormone receptor,GHR ELISA Kit
毛兰素（标准品）3＇-Hydroxy-3,4,4＇,5-tetraMethoxybibenzyl质量规格：供含量测定用 冰冻切片组织组蛋白H3-K9甲基化荧光显微镜检测试剂盒10/20 HumanIerleukin17,IL-17ELISAKit 人白介素17(IL-17)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
石斛酚（标准品）dendrophenol质量规格：鉴别 RatFattyacyl-CoAsyhetase,ACSELISA试剂盒大鼠脂酰辅酶A合成酶(ACS)ELISA试剂盒规格：96T/48T HumanMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISA试剂盒人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠组蛋白脱乙酰酶(HDAC1)ELISA试剂盒 ，英文名： HDAC1 ELISA Kit 1258-84-0扁塑藤素说明书 Pristimerin
小鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA检测试剂盒Mouseplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 96T/48T 572-30-5扁蓄苷品牌 Avicularin
人抗氨酰NA合成酶,细胞质(AARS)抗体试剂盒 Human ai alanyl-NA syhetase,cylasmic(AARS)aibody ELISA kit 表大戟二烯醇规格 Tirucallol
rabbitTissuePolypeptideAigen,TPAELISAKit兔子组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒规格：96T/48T 1072-93-1表告依春厂家 epigoitrin
载玻片细胞CYTOCHROMEC蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20 490-46-0表儿茶素说明书 Epicatechin
BJ5183电击感受态细胞86632-03-33,4,5-三咖啡酰奎宁酸厂家 3,4,5-Tricaffeoylquinic acid 组织PAK2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20
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