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BJ5183-AD-1电击感受态细胞
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 9:52:30
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详细内容
BJ5183-AD-1是携带了腺病毒质粒pAdeasy-1的BJ5183菌株。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| BJ5183-AD-1电击感受态细胞 | BJ5183-AD-1 Electroporation-Competent Cell | 5×50μl|20×50μl |
BJ5183菌株是一种具有较高重组活力的菌株，是目腺病毒系统常用的感受态细胞。
BJ5183菌株含有sbcBC recBC双重突变，赋予BJ5183细胞较强的重组能力，有利于转入的目的基因与腺病毒骨架质粒的重组。endA1(缺失核酸内切酶)的突变有利
于重组DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。BJ5183-AD-1菌株细胞中已经提转入了腺病毒质粒pAdeasy-1[encodes the Adenovirus-5 genome(E1/E3 deleted)]，赋予该菌株氨苄抗性，在病毒质粒构建时，只需转入线性化的目的质粒即可，简化了实验步骤，提高了病毒质粒重组概率。
Strr赋予BJ5183-AD-1菌株链霉素抗性。
BJ5183-AD-1电击感受态细胞适用于普通质粒和大质粒的构建，经特殊工艺制作，pCAMBIA2301质粒(size:1163bp)检测转化效率>1×106 cfu/μg DNA。
保存条件：-80℃
紫丁香酚苷（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Syringin 英文名称MouseFXELISAKit小鼠凝血因子X(FX)规格：96T/48T 大鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)ELISA试剂盒 ，英文名： MUC1 ELISA Kit
竹节参皂苷IVa（标准品）质量规格：供含量测定用chikusetsu saponin Iva VMA高效液相色谱电化学定量检测试剂盒20 人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA检测试剂盒Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit 96T/48T
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犬血栓体蛋白(TpP)试剂盒 Canine thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit 524-17-4蝙蝠葛碱说明书 Dauricine
英文名称Mouse14-3-3proteinELISAKit小鼠14-3-3蛋白(14-3-3pro)规格：96T/48T 1258-84-0扁塑藤素品牌 Pristimerin
肠集聚型大肠埃希菌(EeroaggregativeE.coli)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20 572-30-5扁蓄苷规格 Avicularin
RatGamma-aminobyricacid,GABAELISA试剂盒大鼠γ氨基(GABA)ELISA试剂盒规格：96T/48T 524-17-4蝙蝠葛碱厂家 Dauricine
BJ5183-AD-1电击感受态细胞873001-54-83,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇厂家 3,29-Dibenzoyl Rarounitriol 组织艾滋病毒1蛋白酶(HIV-1PROTEASE)活性荧光淬灭法定量检测试剂盒20
87205-99-0二氢丹参酮Ⅰ说明书 Dihydrotanshi I 组织艾滋病毒1蛋白酶(HIV-1PROTEASE)活性比色法定量检测试剂盒20
86639-52-37-乙基-10羟基喜树碱说明书 7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin 组织β-内酰胺酶报告基因活性荧光定量检测试剂盒20
866366-86-1噻嗪二酮苷规格 Xanthiside 组织β氨基己糖苷酶(β-hexosaminidase)活性比色法定量检测试剂盒20
86632-03-33,4,5-三咖啡酰奎宁酸品牌 3,4,5-Tricaffeoylquinic acid 组织α-L-岩藻糖苷酶(AFU)比色法定量检测试剂盒20
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
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