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XL1-Blue电击感受态细胞
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详细内容
XL1-Blue电击感受态细胞只能用于电击转化,不能用于热激转化。XL1-Blue菌株能保证高拷贝质粒稳定复制,recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。hsdR17突变导致EcoK核酸内切酶系统缺失,增强了外源DNA的稳定性和提取质量。lacIqZΔM15的存在使XL1-Blue菌株可用于蓝、白斑筛选。此菌株具有四环素抗性。

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| XL1-Blue电击感受态细胞 | XL1-Blue Electroporation-Competent Cell | 5×50μl|20×50μl |
XL1-Blue电击感受态细胞适用于各种文库构建,经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率可达1×1010 cfu/μg DNA。
保存条件:-80℃
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
紫蓳灵(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Corynoline 人游离雌三醇(FE3)ELISA检测试剂盒humanfreeEsiol,FE3ELISAKIT 96T/48T 全组织细胞色素C氧化酶活性染色试剂盒10
紫云英苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Astragaline 大鼠金属转运蛋白1(MTP1)试剂盒 Rat Metal anspoer Protein 1,MTP1 ELISA Kit ELISAKitADH/VP/AVP人抗利尿激素/精氨酸加压素规格:48T/96T
棕榈酸(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Palmitic acid 英文名称Ratβ2-GP1Ig(A,G,M)ELISAKit大鼠β2糖蛋白1抗体Ig(A,G,M)(β2-GP1)ELISAKit规格:96T/48T 大鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒 ,英文名: MUC5AC ELISA Kit
王不留行黄酮苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Vaccarin 咖啡阿斯巴塘(aspaame)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒20 人抗胰蛋白酶(AT)ELISA检测试剂盒HumanAi-ypsin,ATELISAKit 96T/48T
英文名称MouseIerleukin-4,IL-4ELISAKIT小鼠白介素4(IL-4)规格:96T/48T 17086⁻⁷6-9杯苋甾酮品牌 Cyasterone
冰冻切片中性脂质苏丹染色试剂盒50 19773-24-1贝母辛规格 Peimisine
RatCholecystokinin,CCKELISA试剂盒大鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒规格:96T/48T 23496-41-5贝母素甲厂家 Peimine
小鼠组织蛋白酶A(CTSA)ELISA试剂盒 ,英文名: CTSA ELISA Kit 18059-10-4贝母素乙说明书 Peiminine
山羊促生长激素释放激素(GHRH)ELISA检测试剂盒Goatgrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISAKit 96T/48T 18513⁻⁷6-3槟榔碱品牌 Arecoline
XL1-Blue电击感受态细胞88206-46-6羌活醇说明书 Noterol 组织半胱氨酸蛋白酶-5(CASPASE-5)活性荧光定量检测试剂盒20
88182-33-6欧当归内酯A规格 Levistilide A 组织半胱氨酸蛋白酶-4(CASPASE-4)活性荧光定量检测试剂盒20
88182-33-6欧当归内酯A规格 Levistilide A 组织半胱氨酸蛋白酶-2(CASPASE-2)活性比色法定量检测试剂盒20
88105-29⁻⁷三七皂苷Fe说明书 Notoginsenoside Fe 组织半胱氨酸蛋白酶-13(CASPASE-13)活性荧光定量检测试剂盒20
87-99-0木糖醇厂家 Xylitol 组织半胱氨酸蛋白酶-13(CASPASE-13)活性比色法定量检测试剂盒20
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