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详细内容
PG13-RFP-Puro稳转株
英文名称 | PG13-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1103 |
中文名称 | RFP 标记的 PG13 稳转株 |
Lot number | PG13-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM + 10% FBS+ 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

背景信息:
PG13 细胞:PG13 是一种成纤维细胞样细胞,来源于患有白血病的小鼠胚胎,是一种逆转录病毒包装细胞系,由 NIH Swiss 小鼠的胚胎细胞衍生而来,常用于基因治疗和病毒载体生产等研究领域。
构建过程:
载体选择:通常会选择含有 RFP(红色荧光蛋白)基因和 Puro(嘌呤霉素抗性)基因的载体。RFP 基因可作为报告基因,方便通过荧光显微镜观察细胞内的表达情况;Puro 基因则用于后续的筛选过程。
转染或感染:使用合适的方法将携带目的基因的载体导入 PG13 细胞中,常用的方法有慢病毒感染法或线性质粒瞬时转染法。慢病毒感染法由于其感染效率高、能稳定整合到宿主基因组等优点,是目前构建稳转株的主流方法。
筛选与鉴定:利用 Puro 基因对转染后的细胞进行筛选,只有成功导入并表达载体的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活。经过一段时间的筛选和培养,获得稳定表达 RFP 的 PG13 细胞株,即 PG13 - RFP - Puro 稳转株。
应用领域:
基因表达研究:RFP 的表达可作为标记,用于观察目的基因在细胞中的表达情况、定位以及表达量的变化等。例如,研究人员可以通过观察红色荧光的强度和分布,了解目的基因在不同条件下的表达水平和细胞内定位。
细胞追踪:在细胞生物学研究中,可将 PG13 - RFP - Puro 稳转株移植到动物模型或体外培养体系中,通过红色荧光追踪细胞的迁移、分化和增殖等过程。比如在肿瘤研究中,将稳转株注射到小鼠体内,观察肿瘤细胞的生长和转移情况。
药物筛选和毒性研究:利用 PG13 - RFP - Puro 稳转株可以研究药物对细胞的作用机制、筛选具有潜在治疗作用的药物。同时,通过观察细胞在药物处理后的荧光变化和细胞活力,评估药物的毒性和细胞对药物的反应。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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