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HT22-GFP-Puro+ffluc2稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/16 11:04:29
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详细内容
HT22-GFP-Puro+ffluc2稳转株
产品名称 | HT22-ffluc2-GFP-Puro 稳转细胞株 |
产品货号 | XY-M1234 |
中文名称 | ffluc2 和 GFP 双标的 HT22 稳转细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转细胞株； （4）稳转细胞株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液（VGA-0046-100） |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |
HT22-GFP-Puro+ffluc2 稳转株概述
HT22 细胞是源自小鼠海马的永生化神经元细胞系，常用于神经生物学、神经毒性、细胞凋亡等研究。
** 稳转株（稳定转染细胞株）** 是通过基因工程手段将外源基因稳定整合到细胞基因组中，使其能够长期表达特定蛋白的细胞群体。
各组件功能与应用
1. GFP（绿色荧光蛋白）
功能：作为报告基因，用于实时可视化观察细胞形态、定位及转染效率。
应用：
荧光显微镜下追踪细胞分布（如神经元突起生长、细胞凋亡过程）。
流式细胞术（FACS）筛选阳性细胞克隆。
体内成像研究（需结合活体荧光成像系统）。
2. Puro（嘌呤霉素抗性基因）
功能：筛选工具，用于富集成功整合外源基因的细胞。
机制：未转入抗性基因的细胞会被嘌呤霉素杀死，存活细胞即为稳定转染株。
应用：稳转株构建过程中的选择性培养，确保外源基因持续表达。
3. ffluc2（萤火虫荧光素酶 2）
功能：生物发光报告基因，需底物荧光素（Luciferin）触发化学反应产生光信号。
优势：
灵敏度高，适用于微量细胞或活体动物体内成像（如肿瘤转移、神经退行性疾病模型）。
信号可定量，通过酶标仪或活体成像系统检测发光强度，反映基因表达水平。
应用场景：
体内外细胞增殖、凋亡、药物疗效的动态监测。
构建荷瘤小鼠模型，追踪肿瘤生长与治疗响应。
稳转株构建流程（示例）
载体构建：将 GFP、Puro 抗性基因和 ffluc2 编码序列克隆至同一质粒载体（如慢病毒载体）。
细胞转染：通过病毒感染（慢病毒 / 逆转录病毒）或化学转染法将载体导入 HT22 细胞。
抗性筛选：添加嘌呤霉素培养 2-3 周，杀死未成功转染的细胞。
单克隆挑选：通过有限稀释法或流式细胞术筛选单克隆细胞，确保外源基因稳定表达。
鉴定验证：
荧光显微镜检测 GFP 表达（绿色荧光）。
luciferin 底物检测 ffluc2 活性（发光信号）。
Western blot 或 PCR 验证目的基因蛋白 / RNA 水平。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：HT22-GFP-Puro+ffluc2稳转株,ffluc2,和,GFP,双标的,HT22,稳转细胞株,HT22,稳转细胞株
