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AML12-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:30
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详细内容
AML12-GFP-Puro稳转株
英文名称 | AML12-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1137 |
中文名称 | GFP 标记的 AML12 稳转株 |
Lot number | AML12-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM/F-12（1:1）(Invitrogen, 11330-032 或11039-021) 89 ml＋ITS Liquid Media Supplement (Sigma, I3146) 1 ml＋Dexamethasone 40 ng/ml + FBS (Gibco) 10 ml + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
AML12-GFP-Puro 稳转株概述
AML12 细胞是源自小鼠肝脏的永生化细胞系，常用于肝脏相关研究（如脂肪代谢、肝损伤、药物毒性等）。**GFP（绿色荧光蛋白）** 作为报告基因，便于通过荧光显微镜或流式细胞术追踪细胞或观察蛋白表达定位。**Puro（嘌呤霉素）** 是一种抗生素，用于筛选成功转入目的基因的稳转细胞株（含 Puro 抗性基因的细胞可在含 Puro 的培养基中存活）。
AML12-GFP-Puro 稳转株的构建与应用
1. 构建流程
载体设计：构建含 GFP 基因和 Puro 抗性基因的质粒载体（如慢病毒载体或逆转录病毒载体）。
细胞转染 / 感染：通过脂质体转染或病毒感染将载体导入 AML12 细胞。
药物筛选：使用嘌呤霉素处理细胞，未成功整合载体的细胞死亡，存活细胞即为稳定表达 GFP 的稳转株（AML12-GFP-Puro）。
2. 核心特性
荧光标记：GFP 持续表达，可实时观察细胞形态、迁移或蛋白定位（如与特定蛋白融合表达时）。
遗传稳定性：GFP 和 Puro 抗性基因整合至细胞基因组，传代后仍稳定表达。
适用性：适用于长期追踪实验（如细胞示踪、细胞周期分析）或需药物筛选的共转染实验。
3. 典型应用场景
肝脏细胞研究：观察 AML12 细胞在脂肪肝模型、药物处理或基因编辑后的动态变化。
细胞示踪：将稳转株移植到小鼠体内，通过荧光成像追踪肝细胞在体内的分布或分化。
蛋白表达分析：结合免疫荧光或流式细胞术，定量分析 GFP 融合蛋白的表达水平。
基因功能研究：与其他基因（如目的基因、shRNA）共转染，利用 Puro 筛选获得双稳转株，研究基因互作。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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