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4T1-GFP-Puro稳转株
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详细内容
4T1-GFP-Puro稳转株
产品名称 | 4T1-GFP-Puro 稳转细胞株 |
产品货号 | XY-M1117 |
中文名称 | GFP 标记的 4T1 稳转细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转细胞株; (4)稳转细胞株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |

构建方法:以 4T1 细胞(ATCC® CRL-2539™)为亲本细胞,通过慢病毒载体 LV-EGFP-PGK-Puro(LV031)进行转染。该载体在脾灶形成病毒(SFFV)启动子控制下编码增强型绿色荧光蛋白(EGFP)cDNA,在小鼠磷酸甘油酸激酶(PGK)启动子下编码嘌呤霉素抗性基因(Puro)。转染后利用嘌呤霉素进行筛选,得到稳定表达 EGFP 的多克隆细胞群体,即 4T1-GFP-Puro 稳转株。
细胞特性:
形态:具有上皮样细胞形态,贴壁生长。
生长条件:完全生长培养基为 RPMI 培养基,添加 10% 胎牛血清、1% 青霉素 / 链霉素和 2µg/ml 嘌呤霉素。细胞在达到汇合状态时需要进行传代,推荐按 1:10 的比例每 3-4 天传代一次。4T1 细胞在生长过程中经常会聚集,当汇合部分的细胞变大时(例如在 10 倍视野下充满整个视野),应进行传代以减少细胞死亡,通常当细胞总体达到 80%-90% 汇合度时进行传代。
检测:经检测无支原体污染,且通过短串联重复序列(STR)分析进行了细胞系鉴定,证实为 4T1 细胞且无种间交叉污染。
应用领域:
体外实验:可用于研究肿瘤细胞的生物学特性,如细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等过程。由于稳定表达 GFP,可通过荧光显微镜或流式细胞术等方法方便地观察和分析细胞的行为变化。
体内实验:将细胞接种到免疫缺陷小鼠或同基因 Balb/c 小鼠体内,可建立乳腺癌动物模型,用于研究肿瘤的生长、转移以及评估抗癌药物的疗效等。不过,由于报告基因的免疫原性,建议在体内研究中使用免疫缺陷小鼠。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:4T1-GFP-Puro稳转株,GFP,标记的,4T1,稳转细胞株,4T1,稳转细胞株















