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第11年

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NCTC clone 929-GFP-Puro稳转株

价格:¥ 电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/15 11:08:30

产品摘要:NCTC clone 929-GFP-Puro稳转株也称为 L 细胞、L-929 细胞,是 1948 年从 100 日龄的雄性 C3H/An 小鼠皮下结缔组织(包括疏松结缔组织和脂肪组织)中分离得到的,是最早建立的连续培养细胞株之一,具有成纤维细胞形态,常用于细胞毒性测试、作为转染宿主等。

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旗舰版网址:http://www.xybio-sh.com

详细内容

NCTC clone 929-GFP-Puro稳转株

英文名称

NCTC clone 929-GFP-Puro polyclonal stable cell line

产品货号

XY-M1119

中文名称

GFP 标记的 NCTC clone 929 稳转株

Lot number

NCTC clone 929-10A1P

细胞规格

复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞

细胞形态

成纤维细胞样

生长特性

贴壁生长

细胞株

构建流程

(1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒;

(2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞;

(3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株;

(4)稳转株质检(COA)。

完全培养基

DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加)

培养条件

(1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。

细胞冻存

无血清冻存液

存储条件

液氮

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背景信息

亲本细胞株:NCTC clone 929 细胞株,也称为 L 细胞、L-929 细胞,是 1948 年从 100 日龄的雄性 C3H/An 小鼠皮下结缔组织(包括疏松结缔组织和脂肪组织)中分离得到的,是最早建立的连续培养细胞株之一,具有成纤维细胞形态,常用于细胞毒性测试、作为转染宿主等。

GFP 和 Puro 的作用:

GFP(绿色荧光蛋白):是一种常用的报告基因,能够在细胞内表达并发出绿色荧光。通过检测 GFP 的荧光信号,可以直观地观察到细胞是否成功转染以及目的基因的表达情况,还可以用于追踪细胞在体内外的分布和迁移等。

Puro(嘌呤霉素):是一种抗生素,用于筛选稳定转染的细胞。在转染过程中,只有成功整合了含有 Puro 抗性基因载体的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而实现对稳转株的筛选。

构建过程

通常是将携带 GFP 基因和 Puro 抗性基因的表达载体,通过转染技术导入 NCTC clone 929 细胞中。常用的转染方法包括脂质体转染、电转染等。转染后,使用含有嘌呤霉素的培养基进行筛选,存活下来的细胞即为稳定转染了 GFP - Puro 基因的细胞株,即 NCTC clone 929 - GFP - Puro 稳转株。

应用领域

细胞生物学研究:可用于观察细胞的生长、增殖、分化等过程。例如,通过观察 GFP 的荧光变化,了解细胞在不同培养条件下的形态和结构变化。

基因表达调控研究:作为模型系统,研究基因的表达调控机制。可以将感兴趣的基因与 GFP 融合,通过观察 GFP 的表达情况,研究该基因在细胞内的表达规律和调控因素。

药物研发和筛选:利用该稳转株可以快速筛选出对细胞生长、增殖有影响的药物。例如,将药物作用于稳转株细胞,通过观察 GFP 荧光强度的变化或细胞的存活情况,评估药物的疗效和毒性。

培养条件

培养基:一般使用 ATCC - 配制的 Eagle's 最低基本培养基,添加 10% 的马血清。也可以使用其他适合 NCTC clone 929 细胞生长的培养基,如 MEM 培养基添加 10% 胎牛血清等。

温度和气体环境:培养温度为 37℃,气体环境为 95% 空气和 5% 二氧化碳。

在培养 NCTC clone 929 - GFP - Puro 稳转株时,需要注意保持细胞培养环境的清洁和无菌,定期更换培养基,以维持细胞的正常生长和稳定表达 GFP。同时,在进行实验操作时,要避免细胞受到机械损伤或化学物质的污染,确保实验结果的准确性和可靠性。

仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。

以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


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