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NCTC clone 929-GFP-Puro稳转株
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详细内容
NCTC clone 929-GFP-Puro稳转株
英文名称 | NCTC clone 929-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1119 |
中文名称 | GFP 标记的 NCTC clone 929 稳转株 |
Lot number | NCTC clone 929-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

背景信息
亲本细胞株:NCTC clone 929 细胞株,也称为 L 细胞、L-929 细胞,是 1948 年从 100 日龄的雄性 C3H/An 小鼠皮下结缔组织(包括疏松结缔组织和脂肪组织)中分离得到的,是最早建立的连续培养细胞株之一,具有成纤维细胞形态,常用于细胞毒性测试、作为转染宿主等。
GFP 和 Puro 的作用:
GFP(绿色荧光蛋白):是一种常用的报告基因,能够在细胞内表达并发出绿色荧光。通过检测 GFP 的荧光信号,可以直观地观察到细胞是否成功转染以及目的基因的表达情况,还可以用于追踪细胞在体内外的分布和迁移等。
Puro(嘌呤霉素):是一种抗生素,用于筛选稳定转染的细胞。在转染过程中,只有成功整合了含有 Puro 抗性基因载体的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而实现对稳转株的筛选。
构建过程
通常是将携带 GFP 基因和 Puro 抗性基因的表达载体,通过转染技术导入 NCTC clone 929 细胞中。常用的转染方法包括脂质体转染、电转染等。转染后,使用含有嘌呤霉素的培养基进行筛选,存活下来的细胞即为稳定转染了 GFP - Puro 基因的细胞株,即 NCTC clone 929 - GFP - Puro 稳转株。
应用领域
细胞生物学研究:可用于观察细胞的生长、增殖、分化等过程。例如,通过观察 GFP 的荧光变化,了解细胞在不同培养条件下的形态和结构变化。
基因表达调控研究:作为模型系统,研究基因的表达调控机制。可以将感兴趣的基因与 GFP 融合,通过观察 GFP 的表达情况,研究该基因在细胞内的表达规律和调控因素。
药物研发和筛选:利用该稳转株可以快速筛选出对细胞生长、增殖有影响的药物。例如,将药物作用于稳转株细胞,通过观察 GFP 荧光强度的变化或细胞的存活情况,评估药物的疗效和毒性。
培养条件
培养基:一般使用 ATCC - 配制的 Eagle's 最低基本培养基,添加 10% 的马血清。也可以使用其他适合 NCTC clone 929 细胞生长的培养基,如 MEM 培养基添加 10% 胎牛血清等。
温度和气体环境:培养温度为 37℃,气体环境为 95% 空气和 5% 二氧化碳。
在培养 NCTC clone 929 - GFP - Puro 稳转株时,需要注意保持细胞培养环境的清洁和无菌,定期更换培养基,以维持细胞的正常生长和稳定表达 GFP。同时,在进行实验操作时,要避免细胞受到机械损伤或化学物质的污染,确保实验结果的准确性和可靠性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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