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CT26-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:30
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详细内容
CT26-GFP-Puro稳转株
产品名称 | CT26-GFP-Puro 稳转细胞株 |
产品货号 | XY-M1125 |
中文名称 | GFP 标记的 CT26 稳转细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转细胞株； （4）稳转细胞株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |
1. 基本背景
细胞来源：
CT26 细胞是小鼠结肠癌细胞系，源自 BALB/c 小鼠的结肠腺癌，具有高增殖能力和一定的转移特性，常用于结肠癌体内外研究。
关键标记：
GFP（绿色荧光蛋白）：通过慢病毒或质粒载体将 GFP 基因稳定整合到 CT26 细胞基因组中，使细胞持续表达 GFP，便于通过荧光显微镜、流式细胞术等实时追踪细胞位置、形态或进行分选。
Puro（嘌呤霉素抗性基因）：载体中同时引入嘌呤霉素抗性基因，用于稳转株筛选 —— 在含有嘌呤霉素的培养基中，未成功整合目的基因的细胞会被杀死，存活细胞即为稳定表达 GFP 的稳转株。
2. 构建流程
通常包括以下步骤：
载体构建：
将 GFP 基因和 Puro 抗性基因插入到合适的表达载体（如慢病毒载体、逆转录病毒载体或质粒）中，形成重组载体。
细胞转染 / 感染：
通过脂质体转染、电穿孔或慢病毒感染等方法将重组载体导入 CT26 细胞。
慢病毒感染效率较高，尤其适用于难转染的细胞类型。
抗性筛选：
转染 / 感染后，使用嘌呤霉素进行压力筛选，持续培养数天至两周，未成功整合载体的细胞死亡，存活细胞即为稳转株。
单克隆化与鉴定：
通过有限稀释法或流式细胞术分选单克隆细胞，确保细胞群遗传背景一致。
利用荧光显微镜观察 GFP 表达强度，通过 Western blot 检测 GFP 蛋白水平，验证稳转株的稳定性。
3. 应用场景
细胞示踪与成像：
GFP 的荧光特性使其可用于实时观察细胞在体内外的行为，如肿瘤细胞的迁移、侵袭过程，或在动物模型（如荷瘤小鼠）中追踪肿瘤生长和转移。
药物筛选与毒性评估：
通过 GFP 荧光强度变化或细胞存活率（结合 MTT、CCK-8 等实验），快速评估药物对稳转株的抑制效果或毒性。
分子机制研究：
可进一步结合其他基因编辑技术（如 CRISPR-Cas9），构建同时表达 GFP 和敲除 / 过表达特定基因的稳转株，用于研究基因功能或信号通路。
细胞分选与富集：
利用流式细胞术（FACS）根据 GFP 荧光强度分选高表达细胞亚群，用于后续实验（如单细胞测序、克隆形成实验）。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：CT26-GFP-Puro稳转株,GFP,标记的,CT26,稳转细胞株,,CT26,稳转细胞株
