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Hepa 1-6-RFP-Puro稳转株
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详细内容
Hepa 1-6-RFP-Puro稳转株
产品名称 | Hepa 1-6-RFP-Puro 稳转细胞株 |
产品货号 | XY-M1107 |
中文名称 | RFP 标记的 Hepa 1-6 稳转细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转细胞株; (4)稳转细胞株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |

背景信息:Hepa 1-6 细胞是 C57/L 小鼠中产生的 BW7756 小鼠肝癌的衍生株,属于贴壁生长的肿瘤细胞,形态上呈上皮细胞样。该细胞系表达白蛋白、甲胎蛋白(AFP)、α1 抗胰蛋白酶、淀粉酶基因,可用于 3D 细胞培养和癌症研究,也是一种合适的转染宿主。
构建过程:通常是利用慢病毒载体将含有 RFP(红色荧光蛋白)基因和 Puro(嘌呤霉素抗性基因)的表达盒导入 Hepa 1-6 细胞中。慢病毒载体可以将目的基因整合到细胞的基因组中,经过嘌呤霉素的筛选,只有那些成功整合了目的基因并稳定表达的细胞才能存活下来,从而得到 Hepa 1-6-RFP-Puro 稳转株。
标记作用:RFP 作为一种荧光标记蛋白,在细胞生物学研究中具有重要作用,可用于标记和示踪细胞,通过荧光显微镜或流式细胞仪等设备,可以方便地观察到细胞的位置、形态以及在体内外的迁移和分布情况等。Puro 是一种氨基糖苷类抗生素,能抑制蛋白质的合成。而 Puro 抗性基因则被用于构建稳定转染细胞系,在含有嘌呤霉素的培养基中,只有成功转入 Puro 抗性基因并表达的细胞才能存活,从而实现对稳转细胞的筛选和维持。
培养条件:一般使用 DMEM 培养基,添加 10% 的胎牛血清(FBS)、1% 的青霉素 / 链霉素双抗,以及 2µg/ml 的嘌呤霉素。在细胞传代过程中,当细胞达到汇合状态时进行传代,推荐按 1:10 的比例,每 3-4 天传代一次,以维持细胞的良好生长状态和稳定的目的基因表达。
应用领域:在癌症研究中,可通过观察 RFP 的荧光来追踪肿瘤细胞在动物模型中的生长、转移和侵袭情况;在细胞生物学研究中,可用于研究细胞的增殖、分化、凋亡等过程;在药物研发中,可作为细胞模型来筛选和评估针对肝癌细胞的药物疗效。由于该细胞系具有可追踪和稳定表达的特性,为相关研究提供了有力的工具。不过,由于报告基因的免疫原性,在体内研究时建议使用免疫缺陷小鼠。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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