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CT26-GFP-Puro单克隆株
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详细内容
CT26-GFP-Puro单克隆株
英文名称 | CT26-GFP-Puro monoclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1109 |
中文名称 | GFP 标记的 CT26 单克隆株 |
Lot number | CT26-10A1S |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)采用无限稀释法筛选单克隆株; (5)单克隆株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

来源与构建
亲本细胞:CT26 细胞是被 N - 亚硝基 - N - 甲基脲烷(NNMU)诱导得到的未分化的小鼠结肠癌细胞,CT26.WT 是其一个克隆形成的细胞系。
构建方法:通常采用慢病毒转染的方式,将携带绿色荧光蛋白(GFP)基因和嘌呤霉素抗性基因(Puro)的慢病毒载体导入 CT26.WT 细胞中。然后利用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了慢病毒载体的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,再通过有限稀释法或单细胞克隆技术,从这些存活的细胞中筛选出单个细胞,进而培养形成 CT26-GFP-Puro 单克隆株。
特性
荧光特性:表达绿色荧光蛋白,在荧光显微镜或其他荧光检测设备下可发出绿色荧光,便于对细胞进行追踪、观察和定位,例如在细胞迁移、侵袭实验中,可以直观地观察到细胞的运动轨迹和分布情况。
抗性特性:对嘌呤霉素具有抗性,能够在含有一定浓度嘌呤霉素的培养基中稳定生长。这一特性使得在细胞培养过程中,可以通过添加嘌呤霉素来维持对细胞的筛选压力,保证细胞株的纯度,防止未转染成功的细胞生长。
细胞形态:与亲本 CT26 细胞类似,呈上皮细胞样,贴壁生长。
培养条件
培养基:一般使用 Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM),并添加 10% 的胎牛血清(FBS)、1x 青霉素 / 链霉素,以及适量的嘌呤霉素,如 3 µg/ml 的嘌呤霉素,以维持细胞的筛选压力和正常生长。
培养环境:需在 37℃、5%CO2 的培养箱中培养,为细胞提供适宜的温度和气体环境,以保证细胞的正常代谢和生长繁殖。
传代:当细胞达到 80%-90% 汇合度时,需要进行传代。常规传代时,可将细胞以 1:10 的比例进行传代,传代间隔时间通常为 3-4 天。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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