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MC38-GFP-Puro单克隆株
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详细内容
MC38-GFP-Puro单克隆株
英文名称 | MC38-GFP-Puro monoclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1111 |
中文名称 | GFP 标记的 MC38 单克隆株 |
Lot number | MC38-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)采用无限稀释法筛选单克隆株; (5)单克隆株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

背景信息
亲本细胞:MC38 细胞是由 M.H.Tan 等使用 1,2 - 二诱导 C57BL/6 产生结肠腺癌后,取组织再经去除成纤维细胞后获得的结肠腺癌上皮细胞系,是大肠癌研究中广泛使用的小鼠细胞模型。
构建方式:通常是将携带绿色荧光蛋白(GFP)基因和嘌呤霉素抗性(Puro)基因的表达载体,通过转染或感染等方式导入 MC38 细胞中。然后利用嘌呤霉素进行筛选,获得稳定表达 GFP 的细胞群体。再通过单细胞分离技术,如有限稀释法、流式细胞术分选法等,从多克隆细胞系中分选出单个细胞,经过扩增得到 MC38 - GFP - Puro 单克隆株。
特点
荧光标记:表达绿色荧光蛋白,可在荧光显微镜下直观地观察细胞的形态、分布以及在体内外的迁移、增殖等情况,便于对细胞进行追踪和定位。
药物抗性:具有嘌呤霉素抗性,在含有嘌呤霉素的培养基中能够生长,而未成功导入抗性基因的细胞则会被杀死,这有助于筛选和维持稳定表达 GFP 的细胞株。
单克隆特性:由单一细胞扩增而来,细胞群体在基因和表型上具有较高的均一性,减少了实验误差,可重复性好,能为实验提供稳定可靠的细胞模型。
培养条件
培养基:一般使用 DMEM 培养基,添加 10% 的胎牛血清,还可根据需要加入适量的抗生素,如青霉素、链霉素等,以防止细菌污染。
培养环境:气相为 95% 空气和 5% 二氧化碳,温度为 37 摄氏度,培养箱湿度保持在 70%-80%。
应用
细胞生物学研究:可用于观察细胞的动态变化,如细胞周期、细胞凋亡、细胞分化等过程中 GFP 的表达变化,从而深入了解细胞的生物学行为。
肿瘤学研究:作为肿瘤细胞模型,可用于研究肿瘤的发生、发展、侵袭和转移机制。例如,通过观察 GFP 标记的肿瘤细胞在动物体内的生长和扩散情况,探讨肿瘤细胞与宿主免疫系统的相互作用,以及评估抗肿瘤药物的疗效等。
基因表达调控研究:利用 GFP 作为报告基因,可研究特定基因在 MC38 细胞中的表达调控机制。通过将目的基因与 GFP 基因融合表达,观察 GFP 的表达情况来推断目的基因的表达水平和调控方式。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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