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详细内容
4T1-GFP-Puro稳转株
英文名称 | 4T1-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1131 |
中文名称 | GFP 标记的 4T1 稳转株 |
Lot number | 4T1-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

构建方式:以小鼠乳腺癌细胞系 4T1 为亲本细胞,通过慢病毒载体 LV-EGFP-PGK-Puro(LV031)进行转染。该载体携带了在脾集落形成病毒(SFFV)启动子控制下的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)cDNA,以及在小鼠磷酸甘油酸激酶(PGK)启动子控制下的嘌呤霉素抗性基因(Puro)。转染后利用嘌呤霉素进行筛选,得到稳定表达绿色荧光蛋白的 4T1 细胞群体,即 4T1 - GFP - Puro 稳转株。
细胞特性:
形态:具有上皮样细胞形态,呈贴壁生长。
生长条件:完全生长培养基为 RPMI 培养基,添加 10% 胎牛血清、1% 青霉素 / 链霉素和 2µg/ml 嘌呤霉素。细胞在 37℃、5% 二氧化碳的培养条件下生长,当细胞达到汇合状态(通常为 80%-90% 汇合度)时,建议以 1:10 的比例每 3-4 天进行传代。4T1 细胞在生长过程中经常会形成细胞团,当汇合的细胞区域变大时,应及时传代以减少细胞死亡。
荧光表达:稳定表达绿色荧光蛋白,可在荧光显微镜下直接观察到绿色荧光,便于对细胞进行追踪和观察,例如用于监测细胞在体外培养中的生长、迁移、分化等过程,以及在体内实验中观察肿瘤细胞在动物模型中的分布、转移等情况。
应用:适用于体外和体内实验。在体外,可用于研究细胞的生物学特性、药物筛选、基因功能等;在体内,将其接种到同基因的 Balb/c 小鼠中,可形成原发性肿瘤,并且根据接种途径的不同,还能转移到肺、肝、淋巴结和脑等部位,有助于研究肿瘤的发生、发展、转移机制以及评估抗癌药物的疗效等。不过,由于该细胞系中报告基因的免疫原性,建议在体内研究中使用免疫缺陷小鼠。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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