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Hepa 1-6-GFP-Puro稳转株
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详细内容
Hepa 1-6-GFP-Puro稳转株
产品名称 | Hepa 1-6-GFP-Puro 稳转细胞株 |
产品货号 | XY-M1132 |
中文名称 | GFP 标记的 Hepa 1-6 稳转细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转细胞株; (4)稳转细胞株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |

一、基本特性
细胞来源
物种:小鼠(Mus musculus)
组织 / 器官:肝脏
背景:Hepa 1-6 细胞由 Clive Wilson 实验室通过甲基胆蒽诱导 C57BL/6 小鼠肝癌建立,保留部分肝细胞功能(如细胞色素 P450 活性)。
标记特征
GFP:通过慢病毒或质粒载体稳定转染,使细胞持续表达 GFP,可通过荧光显微镜或流式细胞术直接观察细胞形态、分布或进行分选。
Puro 抗性基因:与 GFP 共表达,赋予细胞嘌呤霉素抗性,用于稳转株的筛选和维持(通过嘌呤霉素压力筛选未成功整合质粒的细胞)。
应用场景
基因表达与定位研究(GFP 作为报告基因)。
细胞示踪(如体内移植后的荧光成像)。
药物毒性或代谢研究(利用肝细胞特性)。
稳转细胞株的构建与功能验证(借助嘌呤霉素筛选系统)。
二、培养与维护
培养基
常用基础培养基:DMEM(高糖),添加 10% 胎牛血清(FBS)、1% 双抗(青霉素 / 链霉素)。
嘌呤霉素维持浓度:通常为 0.5–2 µg/mL(需预实验确定最佳浓度,避免细胞毒性)。
培养条件
温度:37℃,5% CO2 。
传代:当细胞密度达 80%–90% 时消化传代,建议消化时间 1–2 分钟(避免过度消化影响细胞状态)。
荧光检测:定期通过荧光显微镜观察 GFP 表达强度,确保标记稳定性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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