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B16F10-RFP-Puro稳转株
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详细内容
B16F10-RFP-Puro稳转株
英文名称 | B16F10-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1133 |
中文名称 | RFP 标记的 B16F10 稳转株 |
Lot number | B16F10-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞来源:B16F10 细胞是 C57BL/6 小鼠来源的黑色素瘤细胞,具有高转移性,常被用于癌症研究,特别是黑色素瘤的发病机制、转移机制以及抗癌药物研发等方面的研究。
相关基因
RFP 基因:即红色荧光蛋白(Red Fluorescent Protein)基因,来源于某些海洋生物,如珊瑚等。该基因编码的蛋白质在特定波长的激发光下会发出红色荧光,可作为报告基因,方便研究人员通过荧光显微镜或流式细胞仪等设备对细胞进行观察、追踪和分析,了解细胞的行为和命运,例如细胞的迁移、分化以及在体内的分布等。
Puro 抗性基因:即嘌呤霉素抗性基因。嘌呤霉素是一种抗生素,能够抑制细胞蛋白质的合成,从而杀死细胞。带有 Puro 抗性基因的细胞则能够抵抗嘌呤霉素的作用,在含有嘌呤霉素的培养基中存活。在构建稳转株时,利用这一特性,通过在培养基中添加嘌呤霉素来筛选成功转入目的基因(如 RFP 基因)的细胞,只有那些整合了 RFP 基因和 Puro 抗性基因的细胞才能在筛选压力下生存并形成稳定转染的细胞株。
构建过程:通常是将含有 RFP 基因和 Puro 抗性基因的表达载体,通过转染或感染的方法导入 B16F10 细胞中。常用的方法如利用慢病毒载体介导的基因转移,慢病毒可以将其携带的基因整合到细胞基因组中,使细胞稳定表达 RFP 蛋白并获得对嘌呤霉素的抗性。然后,在含有嘌呤霉素的选择培养基中培养细胞,未成功转入基因的细胞会因嘌呤霉素的作用而死亡,存活下来的细胞即为稳定转染了 RFP 基因和 Puro 抗性基因的 B16F10-RFP-Puro 稳转株。
应用领域
细胞生物学研究:由于 RFP 的荧光特性,可用于观察细胞的形态、结构和动态变化,例如研究细胞的分裂、凋亡过程中细胞形态的改变,以及细胞内细胞器的分布和运动等。
肿瘤学研究:B16F10 细胞本身是黑色素瘤细胞,构建成稳转株后,可在体内外研究肿瘤细胞的生长、侵袭和转移机制。例如,将稳转株细胞接种到动物模型中,通过观察 RFP 荧光来追踪肿瘤细胞在体内的生长位置、转移情况,以及评估不同治疗手段对肿瘤生长和转移的影响。
药物研发:可作为药物筛选的模型细胞,用于筛选和评估针对黑色素瘤或其他相关疾病的潜在治疗药物。通过观察药物对稳转株细胞生长、增殖、凋亡等指标的影响,以及 RFP 荧光变化所反映的细胞状态改变,来判断药物的疗效和作用机制。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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