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B16F10-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:30
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详细内容
B16F10-GFP-Puro稳转株
英文名称 | B16F10-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1135 |
中文名称 | GFP 标记的 B16F10 稳转株 |
Lot number | B16F10-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
B16F10-GFP-Puro 稳转株概述
B16F10 细胞是小鼠来源的黑色素瘤细胞系，常用于肿瘤生物学、免疫学等研究。**GFP（绿色荧光蛋白）** 作为报告基因，可通过荧光显微镜直观观察细胞表达情况，便于追踪细胞行为或筛选阳性克隆。**Puro（嘌呤霉素）** 是一种抗生素，用于稳转株的筛选 —— 通过构建含 Puro 抗性基因的载体，转染后用嘌呤霉素处理细胞，未成功整合目的基因的细胞会被杀死，存活细胞即为稳定表达 GFP 的稳转株。
关键特性
特性 说明
细胞来源 小鼠，黑色素瘤（B16F10 细胞系）
标记基因 GFP（绿色荧光，激发 / 发射波长约 488/507 nm）
筛选标记 Puro 抗性基因（对嘌呤霉素具有耐药性）
应用场景 肿瘤迁移与侵袭研究、细胞示踪、药物递送系统评估、基因表达调控机制研究等
培养条件 通常使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基，37℃、5%CO2 环境，需维持嘌呤霉素抗性
构建流程（简要）
载体构建：将 GFP 基因与 Puro 抗性基因插入到合适的表达载体（如慢病毒载体）中。
细胞转染：通过病毒感染（慢病毒 / 逆转录病毒）或化学转染法将载体导入 B16F10 细胞。
筛选与克隆化：用嘌呤霉素（通常浓度 1-5 µg/mL）处理细胞，杀死未转染的细胞，存活细胞通过有限稀释法或流式细胞术筛选单克隆。
鉴定：通过荧光显微镜观察 GFP 表达强度，Western blot 验证蛋白水平，测序确认基因整合正确性。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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