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Sp2/0-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:17
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详细内容
Sp2/0-GFP-Puro稳转株
英文名称 | Sp2/0-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1162 |
中文名称 | GFP 标记的 Sp2/0 稳转株 |
Lot number | Sp2/0-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 圆形细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
Sp2/0-GFP-Puro 稳转株概述
Sp2/0 细胞是一种小鼠骨髓瘤细胞系，常用于制备单克隆抗体，具有无限增殖能力但缺乏抗体分泌功能。**GFP（绿色荧光蛋白）** 作为报告基因，可通过荧光显微镜直观观察细胞状态或定位；**Puro（嘌呤霉素）** 是一种抗生素，用于稳转株筛选，含 Puro 抗性基因的细胞可在筛选压力下存活。
核心特点：
稳转株特性：通过基因工程手段将 GFP 基因和 Puro 抗性基因稳定整合到 Sp2/0 细胞基因组中，实现持续表达 GFP且对嘌呤霉素具有抗性。
荧光标记优势：GFP 表达使细胞可通过荧光成像追踪，适用于细胞示踪、蛋白定位、细胞分选（如 FACS）等实验。
筛选机制：利用嘌呤霉素抗性基因，在转染后通过添加嘌呤霉素培养基筛选成功整合目的基因的细胞克隆，确保稳转株的纯度。
构建流程（简要）：
载体构建：
构建含 GFP 基因和 Puro 抗性基因的重组质粒（如慢病毒载体或质粒载体）。
载体需包含启动子（如 CMV）驱动 GFP 表达，同时携带 Puro 抗性基因（如puroR）。
细胞转染：
通过脂质体转染、电穿孔或病毒感染（如慢病毒）将重组载体导入 Sp2/0 细胞。
筛选与克隆化：
转染后加入嘌呤霉素（浓度需预实验优化，通常为 0.5–2 µg/mL），未成功整合抗性基因的细胞死亡，存活细胞为阳性克隆。
通过有限稀释法或单细胞分选获得单克隆稳转株，确保基因表达的均一性。
鉴定与扩增：
荧光显微镜检测 GFP 表达强度及稳定性。
传代培养验证抗性和荧光表达的持续性。
应用场景：
细胞生物学研究：
实时观察细胞形态、增殖或凋亡过程（GFP 标记细胞质或细胞核）。
细胞示踪实验（如体内移植后通过荧光信号追踪细胞分布）。
抗体工程：
作为宿主细胞用于构建分泌特异性抗体的杂交瘤细胞（结合 Sp2/0 的无限增殖特性与 GFP 的可视化优势）。
药物筛选与毒性分析：
通过 GFP 荧光强度变化评估药物对细胞活性的影响（如细胞凋亡导致荧光减弱）。
利用嘌呤霉素抗性筛选共转染的其他目的基因（如抗体轻链 / 重链基因）。
流式细胞术（FACS）：
基于 GFP 荧光强度分选高表达克隆，或分离混合细胞中的阳性细胞群。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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