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RM-1-GFP-Puro稳转株
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详细内容
RM-1-GFP-Puro稳转株
英文名称 | RM-1-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1169 |
中文名称 | GFP 标记的 RM-1 稳转株 |
Lot number | RM-1-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

定义与构建:RM - 1 是某种特定的细胞系,通过慢病毒感染等方式将含有绿色荧光蛋白(GFP)基因和嘌呤霉素(Puro)抗性基因的外源 DNA 整合到 RM - 1 细胞的基因组中,经过嘌呤霉素筛选后,得到能持续稳定表达 GFP 的细胞株,即 RM - 1 - GFP - Puro 稳转株。
特性与应用:
可视化标记:GFP 作为报告基因,在荧光显微镜下可发出绿色荧光,便于直观观察细胞的位置、形态和生长状态等,也可用于追踪细胞在体内外的迁移、分化等过程。例如,在研究细胞在动物模型中的分布时,通过检测 GFP 荧光就能明确细胞的位置。
药物筛选标记:Puro 抗性基因使稳转株对嘌呤霉素具有抗性。在细胞培养过程中,加入嘌呤霉素可杀死未成功转染的细胞,只有整合了外源 DNA 并表达 Puro 抗性蛋白的 RM - 1 - GFP - Puro 稳转株才能存活,从而实现稳定转染细胞的筛选和维持。
用于基因功能研究:可通过观察 GFP 的表达情况,间接反映目的基因的表达和调控情况。如果目的基因与 GFP 融合表达,还能研究目的基因编码蛋白的定位和功能。比如,若想知道某一基因在细胞内的作用位点,将其与 GFP 融合后,通过观察 GFP 的荧光分布就能推测该基因产物的位置。
蛋白表达与生产:利用该稳转株可稳定表达目的蛋白,用于蛋白结构与功能研究、抗体生产等。由于是稳定表达,相比瞬时转染,能更持续、稳定地产生大量目的蛋白,且批次间差异小,有利于大规模生产蛋白制品。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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