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Nalm-6-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/22 8:33:24
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详细内容
Nalm-6-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | Nalm-6-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2128 |
中文名称 | ffluc 标记的 Nalm-6 稳转株 |
Lot number | Nalm-6-24D3P+31B3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T12.5细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
关键要素解析：
Puro（嘌呤霉素）
是一种抗生素，常用于稳转株筛选。通过将携带嘌呤霉素抗性基因的质粒转染细胞，只有成功整合外源基因的细胞能在含嘌呤霉素的培养基中存活，从而筛选出稳转株。
ffluc（萤火虫荧光素酶）
是一种报告基因，其表达的荧光素酶可催化荧光素氧化产生生物发光。常用于：
体内成像：通过活体成像技术监测肿瘤生长、转移等（需注射荧光素底物）。
体外检测：定量分析基因表达水平、药物处理效果等（通过酶标仪检测发光强度）。
构建流程（示例）
载体构建
构建含ffluc 基因和嘌呤霉素抗性基因的重组质粒（如 pLVX-ffluc-Puro）。
细胞转染
通过病毒感染（如慢病毒）或化学转染法将质粒导入 Nalm-6 细胞。
筛选与鉴定
用嘌呤霉素培养基筛选存活细胞，经有限稀释法或流式细胞术获得单克隆稳转株。
通过Western blot检测 ffluc 蛋白表达，生物发光检测验证功能活性。
应用场景
肿瘤研究
建立荷瘤小鼠模型：将稳转株接种至动物体内，通过活体成像动态追踪肿瘤生长和治疗反应。
药物开发
筛选抗肿瘤药物：通过 ffluc 发光强度变化评估药物对细胞增殖或凋亡的影响。
机制研究
研究基因功能：结合 ffluc 标记分析特定基因在白血病细胞中的作用机制。
注意事项
稳定性验证
需定期传代培养并检测 ffluc 表达，确保长期稳定性（避免基因沉默或丢失）。
实验设计
体内成像需考虑荧光素代谢动力学（如小鼠需腹腔注射荧光素，底物半衰期约 20-30 分钟）。
对照设置
建议设置未转染细胞（Nalm-6 野生型）和仅含抗性基因的细胞（Nalm-6-Puro）作为阴性对照。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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