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NCI-H460-RFP-Puro稳转株
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详细内容
NCI-H460-RFP-Puro稳转株
英文名称 | NCI-H460-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1133 |
中文名称 | RFP 标记的 NCI-H460 稳转株 |
Lot number | NCI-H460-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640+10%FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

构建原理:通过将携带红色荧光蛋白(RFP)基因和嘌呤霉素抗性(Puro)基因的表达载体,利用基因转染技术稳定整合到 NCI - H460 细胞的基因组中,使细胞能够稳定表达 RFP 蛋白,并且对嘌呤霉素具有抗性,便于通过嘌呤霉素筛选获得稳定转染的细胞株。
细胞特性
来源:NCI - H460 细胞是 1982 年由 A.F. Gazdar 从一位患有大细胞肺癌的男性胸腔积液中建立的,该细胞角蛋白、波形蛋白阳性,在肺癌研究中应用广泛。
形态:通常为上皮细胞样,呈贴壁生长。
荧光表达:在荧光显微镜下可观察到红色荧光,可用于示踪细胞的位置、形态和迁移等,也可用于在体外实验和体内成像研究中监测细胞的增殖、分布和存活情况。
药物抗性:对嘌呤霉素具有抗性,在含有嘌呤霉素的培养基中能够正常生长,而未成功转染的细胞则会被嘌呤霉素杀死,从而实现对稳转株细胞的筛选和维持培养。
培养条件:一般使用 RPMI - 1640 培养基,添加 10% 胎牛血清(FBS)、2.0 µg/mL 嘌呤霉素以及 1% 青霉素 - 链霉素(P/S)。培养条件为气相 95% 空气 + 5%CO2 ,温度 37℃。传代比例通常为 1:3 - 1:6,每 2 - 3 天换液一次,传代周期为 24 - 48 小时。冻存条件是 60% 基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO,液氮储存。
应用领域
癌症研究:作为肺癌细胞模型,可用于研究肺癌的发生、发展、侵袭和转移机制,以及筛选和评估潜在的抗癌药物。
基因功能研究:通过观察 RFP 的表达情况,可研究特定基因在细胞中的功能和调控机制,也可用于研究基因表达的时空变化。
细胞示踪研究:在体内外实验中,利用 RFP 的荧光特性对细胞进行示踪,了解细胞在生物体内的分布、迁移和归巢等过程,为细胞治疗和组织工程等领域的研究提供重要的实验依据。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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