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K562-GFP-Puro单克隆株
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详细内容
K562-GFP-Puro单克隆株
英文名称 | K562-GFP-Puro monoclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1100 |
中文名称 | GFP 标记的 K562 单克隆株 |
Lot number | K562-10A1S |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)采用无限稀释法筛选单克隆株; (5)单克隆株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞来源与构建
来源:K562-GFP-Puro 单克隆株源于 K562 细胞,K562 细胞是 1970 年 Lozzio 等从一名 53 岁女性慢性髓性白血病爆发期患者的胸水中分离建立的人类髓性白血病细胞 ,属于性造血恶性细胞 。
构建:以携带增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因(受脾灶形成病毒 SFFV 启动子调控 )和嘌呤霉素抗性基因(puro,受磷酸甘油酸激酶启动子调控 )的慢病毒载体(如 lv-sffv-egfp-pgk-puro )转导亲本 K562 细胞 。经嘌呤霉素筛选,再用基于甲基纤维素的半固体培养基筛选,获得高表达 eGFP 的细胞群体,即 K562-GFP-Puro单克隆株 。
细胞特性
形态:在显微镜下观察,具有白血病细胞的一般形态特征 。
标记物:稳定表达绿色荧光蛋白(GFP),在荧光显微镜下可观察到绿色荧光 ,便于细胞示踪、定位及在细胞群体中进行识别 ;携带嘌呤霉素抗性基因,可在含嘌呤霉素的培养基中存活 ,用于维持细胞的特定遗传特性。
生长特性:悬浮生长 。完全培养基通常为含 15% 胎牛血清(FBS)和 1% 青霉素 / 链霉素的伊思柯夫改良杜氏培养基(IMDM) 。为长期维持高 GFP 表达,建议在培养基中添加 6ug/ml 的嘌呤霉素 。细胞密度宜维持在 5×105 - 2×106 个 /ml ,可通过稀释传代,偶尔用离心法传代以减少培养物中的碎片 。
应用领域
细胞生物学研究:借助 GFP 荧光特性,研究细胞的增殖、分化、迁移、凋亡等过程 ,追踪细胞在体内外环境中的行为变化 。
药物研发:用于筛选针对白血病及相关血液系统疾病的药物 ,评估药物对细胞生长、增殖、存活的影响 ,研究药物作用机制 。
肿瘤研究:作为肿瘤细胞模型,探究肿瘤发生发展机制、肿瘤细胞与微环境相互作用等 。
安全注意事项
该细胞株的慢病毒载体是自我失活型(SIN),病毒增强子和启动子已缺失 ,降低了生物安全风险 。但仍需在生物安全二级(BSL-2)条件下,由专业人员操作 。若满足特定标准,部分机构可能允许在 BSL-1 条件下处理 。 此外,该细胞株需检测支原体污染,确保无支原体污染后才可使用 。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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