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Nalm-6-GFP-Puro+ffluc2稳转株
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详细内容
Nalm-6-GFP-Puro+ffluc2稳转株
产品名称 | Nalm-6-GFP-ffluc2-Puro 稳转细胞株 |
产品货号 | XY-H2129 |
中文名称 | ffluc2、GFP 双标的 Nalm-6 稳转细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转细胞株; (4)稳转细胞株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |

Nalm-6-GFP-Puro+ffluc2 稳转株概述
Nalm-6 细胞是一种源自人类 B 细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)的细胞系,常用于白血病研究、药物筛选及肿瘤生物学等领域。稳转株(稳定转染细胞株)是指通过基因工程手段将外源基因稳定整合到细胞基因组中,使其能够长期表达特定蛋白或标记的细胞群体。
关键标记与特性
GFP(绿色荧光蛋白)
作为报告基因,用于直观观察细胞形态、定位及转染效率,通过荧光显微镜或流式细胞术可快速检测。
优势:非侵入性、检测便捷,适用于细胞追踪、蛋白定位研究。
Puro(嘌呤霉素抗性基因)
用于筛选成功转染的细胞。嘌呤霉素是一种抗生素,可杀死未整合抗性基因的细胞,确保稳转株的纯度。
ffluc2(萤火虫荧光素酶 2)
一种生物发光报告基因,需荧光素底物参与反应,通过酶促反应产生光子,可借助活体成像系统(如 IVIS)定量检测细胞数量、肿瘤生长或药物疗效。
优势:灵敏度高,适用于体内外实时监测(如动物模型中的肿瘤转移研究)。
应用场景
肿瘤研究
体内成像:通过 ffluc2 标记,在活体动物中动态追踪肿瘤细胞的增殖、转移及对治疗的响应(如化疗药物效果评估)。
体外分析:利用 GFP 观察细胞形态或共定位蛋白,结合流式细胞术分选阳性细胞。
药物筛选
通过嘌呤霉素筛选稳定表达目标基因的细胞,构建耐药性或靶点过表达模型,用于高通量药物筛选。
基因功能研究
分析外源基因(如癌基因、抑癌基因)在 Nalm-6 细胞中的稳定表达对细胞增殖、凋亡、信号通路的影响。
构建流程(简要)
载体构建:将 GFP、Puro 抗性基因及 ffluc2 基因克隆至同一质粒载体(如慢病毒载体),确保各基因独立表达。
细胞转染:通过慢病毒感染或电穿孔法将载体导入 Nalm-6 细胞。
筛选与扩增:使用嘌呤霉素培养基筛选存活细胞,经有限稀释法或流式分选获得单克隆稳转株。
鉴定验证:
荧光检测:确认 GFP 和 ffluc2 的表达(显微镜 / 流式细胞术)。
生物发光检测:加入荧光素底物,检测 ffluc2 活性(酶标仪或活体成像)。
稳定性验证:传代培养后检测标记基因的持续表达。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:Nalm-6-GFP-Puro+ffluc2稳转株,ffluc2,GFP,双标的,Nalm-6,稳转细胞株,Nalm-6,稳转细胞株















