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KURAMOCHI-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/22 8:33:24
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详细内容
KURAMOCHI-GFP-Puro稳转株
英文名称 | KURAMOCHI-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2114 |
中文名称 | GFP 标记的 KURAMOCHI 稳转株 |
Lot number | KURAMOCHI-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮样细胞 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
基本概念
KURAMOCHI 细胞系：KURAMOCHI 细胞是一种常用于研究的细胞系，可能来源于特定的组织或肿瘤，具有其自身的生物学特性和功能。
GFP（绿色荧光蛋白）：是一种能在蓝色到紫外光照射下发出明亮绿色荧光的蛋白质。在 KURAMOCHI-GFP-Puro 稳转株中，GFP 基因被导入 KURAMOCHI 细胞，使细胞能够表达 GFP，从而可以通过荧光显微镜等技术对细胞进行观察和追踪，了解细胞的生长、迁移、分化等过程。
Puro（嘌呤霉素）抗性基因：是一种用于筛选的标记基因。在构建稳转株的过程中，只有成功导入了包含 GFP 基因和 Puro 抗性基因载体的细胞，才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活，从而实现对稳转株细胞的筛选。
构建方法
载体构建：将 GFP 基因和 Puro 抗性基因插入到合适的载体中，构建成重组表达载体。该载体需要包含启动子、增强子等调控元件，以确保 GFP 基因和 Puro 抗性基因能够在 KURAMOCHI 细胞中稳定表达。
细胞转染：通过转染质粒或病毒侵染的方法将构建好的含目的基因的载体导入 KURAMOCHI 细胞。常用的转染方法包括脂质体转染法、电穿孔法、慢病毒感染法等，其中慢病毒感染法由于其高效整合、宿主范围广等优点，是制备 KURAMOCHI-GFP-Puro 稳转株的理想方法。
筛选与鉴定：利用嘌呤霉素对转染后的细胞进行筛选，只有成功整合了重组载体的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中生长形成阳性克隆。然后通过荧光显微镜观察、Western blot、PCR 等方法对筛选得到的细胞进行鉴定，确认 GFP 基因是否在细胞中稳定表达以及表达水平的高低。
应用领域
细胞生物学研究：可以用于观察细胞的形态、结构和动态变化，研究细胞的增殖、凋亡、分化、迁移等过程。例如，通过观察 GFP 的荧光变化，可以实时监测细胞在不同培养条件下或受到不同刺激后的行为变化。
基因功能研究：将目的基因与 GFP 基因融合表达，通过观察 GFP 的定位和表达情况，了解目的基因在细胞内的定位和功能。同时，也可以通过对 KURAMOCHI-GFP-Puro 稳转株进行基因敲除、敲低或过表达等操作，研究目的基因对细胞生物学功能的影响。
药物研发：可用于药物筛选和药物作用机制的研究。例如，以 KURAMOCHI-GFP-Puro 稳转株为模型，筛选能够影响细胞生长、增殖、凋亡等过程的药物，并通过观察 GFP 的变化来初步探讨药物的作用靶点和作用机制。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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