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OAW28-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/22 8:33:24
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详细内容
OAW28-GFP-Puro稳转株
英文名称 | OAW28-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2117 |
中文名称 | GFP 标记的 OAW28 稳转株 |
Lot number | OAW28-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 表皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 10 ug/mL牛胰岛素 |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
1. 基本概念
细胞背景：
OAW28：可能是某种特定来源的细胞系（如肿瘤细胞、正常体细胞等），具体需结合研究领域判断（例如，部分文献中 OAW28 可能与卵巢癌相关）。
GFP：绿色荧光蛋白（Green Fluorescent Protein），作为报告基因，用于实时追踪细胞内蛋白质定位、细胞增殖或迁移等过程，通过荧光显微镜可直接观察。
Puro：嘌呤霉素（Puromycin），是一种抗生素，用于稳转株的筛选和维持 —— 通过将携带Puro 抗性基因的质粒转染细胞，未成功整合目的基因的细胞会被嘌呤霉素杀死，从而获得稳定表达目标基因的细胞株。
稳转株特性：
目标基因（如 GFP）通过质粒载体稳定整合到细胞基因组中，可长期传代并持续表达，避免了瞬时转染的表达时效性问题。
2. 构建流程
通常包括以下步骤：
载体构建：
将GFP 基因和Puro 抗性基因插入到合适的质粒载体中（如慢病毒载体、逆转录病毒载体等），形成重组质粒。
细胞转染：
通过脂质体转染、电穿孔或病毒感染（如慢病毒）等方法，将重组质粒导入 OAW28 细胞。
抗生素筛选：
转染后的细胞在含有嘌呤霉素的培养基中培养，未成功整合质粒的细胞死亡，存活细胞即为稳定表达 GFP 的单克隆细胞株（需通过有限稀释法或流式细胞术筛选单克隆）。
鉴定与扩增：
通过荧光显微镜观察 GFP 表达情况，利用 Western blot 或流式细胞术验证表达水平，确保稳定性后扩大培养。
3. 应用场景
细胞成像与追踪：
GFP 的荧光特性使其可直接用于观察细胞形态、细胞内结构（如细胞器定位）或细胞在体内的迁移（如动物模型中的肿瘤细胞追踪）。
药物筛选与毒性分析：
结合嘌呤霉素筛选系统，可用于构建稳定表达特定靶点的细胞模型，用于高通量药物筛选（如评估药物对细胞增殖的影响）。
基因功能研究：
通过过表达或敲降 GFP 标记的融合蛋白，研究基因在细胞周期、凋亡、信号通路中的作用。
细胞生物学基础研究：
例如，分析细胞骨架动态、蛋白互作（结合免疫共沉淀技术）等。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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