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CT-2A-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:17
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详细内容
CT-2A-GFP-Puro稳转株
英文名称 | CT-2A-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1172 |
中文名称 | GFP 标记的 CT-2A 稳转株 |
Lot number | CT-2A-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮样细胞 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
1. 基本概念解析
CT-2A 细胞：
CT-2A 是小鼠胶质母细胞瘤（glioblastoma）细胞系，具有恶性增殖能力，常用于神经系统肿瘤模型的构建。
GFP 标记：
GFP（绿色荧光蛋白）通过基因转染整合到细胞基因组中，使细胞表达 GFP，便于通过荧光显微镜或流式细胞术等手段进行实时追踪、定位或分选。
Puro 抗性筛选：
Puro（嘌呤霉素）是一种抗生素，稳转株通过引入携带 Puro 抗性基因的质粒，使成功整合目的基因的细胞在含 Puro 的培养基中存活，未成功转染的细胞被淘汰，从而获得稳定表达 GFP 的细胞群体。
2. 构建流程与技术要点
载体设计：
构建含 GFP 基因和 Puro 抗性基因的重组质粒（如慢病毒载体、逆转录病毒载体等），通常需在 GFP 基因前插入强启动子（如 CMV 启动子）以确保稳定表达。
转染与筛选：
通过脂质体转染、电穿孔或病毒感染等方法将载体导入 CT-2A 细胞。
转染后使用 Puro 进行压力筛选（浓度需预实验优化），存活细胞经有限稀释法或单细胞克隆获得单克隆稳转株。
鉴定验证：
荧光检测：显微镜下观察 GFP 荧光强度及分布，确认表达稳定性。
分子生物学验证：通过 PCR 检测 GFP 基因整合，Western blot 检测 GFP 蛋白表达水平。
功能验证：检测细胞增殖、凋亡、迁移等生物学行为是否受 GFP 表达影响（需与野生型 CT-2A 细胞对比）。
3. 应用场景
体内外追踪研究：
体外：观察细胞形态、增殖动力学或药物处理后的荧光变化（如凋亡时细胞膜完整性改变导致 GFP 泄漏）。
体内：将细胞接种至小鼠（如免疫缺陷鼠）构建原位肿瘤模型，通过活体成像系统监测肿瘤生长、转移及药物响应（GFP 信号强度反映肿瘤负荷）。
细胞分选与纯化：
利用流式细胞术（FACS）根据 GFP 荧光强度分选高表达细胞，用于制备单细胞悬液或富集特定亚群。
基因功能研究工具：
若 GFP 与目的基因（如致癌基因、抑癌基因）共表达，可通过荧光标记间接追踪目的基因的表达模式，或用于共定位实验（如与线粒体、细胞核标记物共染）。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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