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STC-1-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:17
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详细内容
STC-1-GFP-Puro稳转株
英文名称 | STC-1-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1180 |
中文名称 | GFP 标记的 STC-1 稳转株 |
Lot number | STC-1-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10％ FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
一、核心组成与构建原理
1. 细胞背景：STC-1 细胞
来源：STC-1 细胞是小鼠小肠内分泌细胞株，通常用于研究肠道激素分泌、细胞增殖及信号转导等机制。
特性：具有分泌功能，可表达多种胃肠激素（如胃泌素、生长抑素等），适合模拟体内内分泌细胞的生理或病理状态。
2. 关键元件
GFP（绿色荧光蛋白）：作为报告基因，表达后可发出绿色荧光，便于通过荧光显微镜或流式细胞术实时追踪细胞位置、形态及基因表达情况。
Puro（嘌呤霉素抗性基因）：作为筛选标记，赋予细胞对嘌呤霉素的抗性，用于稳转株构建过程中筛选成功整合外源基因的细胞克隆。
3. 构建流程
载体构建：将 GFP 基因和 Puro 抗性基因插入到合适的载体（如慢病毒载体、质粒载体）中，形成重组表达载体。
细胞转染 / 感染：通过脂质体转染、电穿孔或病毒感染（如慢病毒）将重组载体导入 STC-1 细胞。
抗性筛选：使用嘌呤霉素处理细胞，未成功整合载体的细胞死亡，存活细胞即为稳定表达 GFP 的稳转株。
单克隆筛选与鉴定：通过有限稀释法或流式细胞术分选单克隆细胞，验证 GFP 表达的稳定性和均一性。
二、主要应用场景
1. 细胞成像与追踪
实时观察：利用 GFP 荧光标记，在活细胞成像中动态监测 STC-1 细胞的迁移、分化、凋亡或与其他细胞 / 分子的相互作用。
组织定位：将稳转株移植到动物模型中，通过荧光成像分析细胞在体内的分布（如肠道组织中的定植）。
2. 基因表达与功能研究
报告基因检测：GFP 的荧光强度可反映目的基因（与 GFP 共表达）的转录或翻译水平，用于分析启动子活性、信号通路调控等。
共定位分析：结合其他荧光标记（如线粒体、细胞核染料），研究目标蛋白在细胞内的定位及共定位关系。
3. 药物筛选与毒性评估
高通量筛选：利用荧光信号强度变化快速评估药物对 STC-1 细胞增殖、凋亡或激素分泌的影响，适用于药物初筛。
毒性监测：通过观察 GFP 标记细胞的形态变化或荧光强度下降，判断化合物的细胞毒性。
4. 细胞示踪与动物模型研究
肿瘤研究：若 STC-1 细胞具有肿瘤特性（如异位表达癌基因），稳转株可用于构建荧光标记的移植瘤模型，追踪肿瘤生长和转移。
免疫研究：在免疫缺陷小鼠中注射 GFP 标记的 STC-1 细胞，分析免疫细胞对靶细胞的识别和清除效率。
三、优势与局限性
优势
稳定性：外源基因整合至细胞基因组，可长期传代并稳定表达 GFP，避免瞬时转染的荧光信号丢失问题。
可视化便捷性：无需额外标记，直接通过荧光显微镜观察，适合动态或高通量实验。
筛选高效性：嘌呤霉素筛选可快速富集阳性细胞，提高稳转株构建效率。
局限性
插入突变风险：外源基因随机整合可能影响细胞内源性基因表达，需通过测序或功能验证排除干扰。
荧光干扰：GFP 的激发光可能与其他荧光探针（如 RFP、Cy3）存在光谱重叠，需合理设计实验方案。
细胞特性改变：基因操作可能影响 STC-1 细胞的原有功能（如激素分泌水平），需通过功能实验验证稳转株的生物学特性。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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