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EO771-GFP-Puro稳转株
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详细内容
EO771-GFP-Puro稳转株
英文名称 | EO771-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1175 |
中文名称 | GFP 标记的 EO771 稳转株 |
Lot number | EO771-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

背景信息:EO771 是一种小鼠乳腺癌细胞系。将绿色荧光蛋白(GFP)基因和嘌呤霉素(Puro)抗性基因通过特定的技术手段导入到 EO771 细胞中,使其成为能够稳定表达 GFP 且对嘌呤霉素具有抗性的细胞株,即 EO771 - GFP - Puro 稳转株。
构建过程:通常先将含有 GFP 基因和 Puro 抗性基因的外源 DNA 克隆到带有相应抗性基因的载体上,然后通过脂质体转染、病毒转染等方法将重组载体导入 EO771 细胞中。载体进入细胞后,会整合到宿主细胞的染色体中,并随细胞分裂稳定传递下去。之后,利用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了外源基因并表达 Puro 抗性蛋白的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而获得稳定表达 GFP 的 EO771 - GFP - Puro 稳转株。
应用领域:
细胞示踪:由于细胞稳定表达 GFP,在荧光显微镜下可以发出绿色荧光,因此可以方便地对 EO771 - GFP - Puro 细胞进行追踪,观察其在体内外的迁移、增殖和分化等过程。例如,在肿瘤研究中,将该稳转株接种到小鼠体内,可以通过荧光成像技术实时监测肿瘤细胞的生长、转移情况。
药物研发:可以利用该稳转株来筛选针对 EO771 细胞的抗肿瘤药物。通过观察药物处理后细胞的生长、凋亡情况以及 GFP 荧光强度的变化,来评估药物的疗效。同时,由于细胞对嘌呤霉素具有抗性,在药物筛选过程中可以方便地使用嘌呤霉素进行筛选,排除未被药物作用的细胞。
基因功能研究:如果要研究某些基因在 EO771 细胞中的功能,可以将目的基因与 GFP - Puro 表达盒一起导入细胞,构建出同时表达目的基因和 GFP 的稳转株。通过观察 GFP 的表达情况来间接反映目的基因的表达水平,进而研究目的基因对细胞生长、凋亡、侵袭等生物学行为的影响。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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