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EO771-RFP-Puro稳转株
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详细内容
EO771-RFP-Puro稳转株
英文名称 | EO771-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1181 |
中文名称 | RFP 标记的 EO771 稳转株 |
Lot number | EO771-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

EO771 细胞背景:EO771 细胞是从雌性 C57BL/6 小鼠的乳腺组织中分离出来的上皮样细胞,具有细长形态,在连续传代过程中表现出遗传不稳定性,其转移能力相比于 4T1 细胞较低,具有致瘤性,可用于建立同源乳腺癌模型。
RFP 的作用:RFP 即红色荧光蛋白,在该稳转株中,它通常作为报告基因。可以方便科研人员通过荧光显微镜等设备直观地观察到细胞是否成功转染以及转染后基因的表达情况。例如,在细胞培养过程中,发出红色荧光的细胞即表明是成功转染并表达相关基因的细胞,便于对这些细胞进行追踪、分选和进一步的研究。
Puro(嘌呤霉素)的作用:嘌呤霉素是一种氨基苷类抗生素,能抑制蛋白质合成。在稳转株构建中,相关载体携带 pac 基因,该基因编码嘌呤霉素 N - 乙酰转移酶,赋予细胞对嘌呤霉素的抗性。当用嘌呤霉素对转染后的细胞进行筛选时,只有成功转染了含有 pac 基因载体的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,未转染或未稳定整合目的基因的细胞则会被杀死,从而筛选出稳定转染的细胞株。
构建过程:一般是将含有 RFP 基因和 pac 基因的表达载体,通过慢病毒感染等方法导入 EO771 细胞。慢病毒具有高效整合、宿主范围广、感染效率高等特点,能将目的基因整合到细胞染色体上。然后利用嘌呤霉素进行筛选,经过一段时间的培养和筛选,获得能够稳定表达 RFP 且对嘌呤霉素具有抗性的 EO771 细胞,即 EO771 - RFP - Puro 稳转株。
应用领域:在乳腺癌研究中,可利用该稳转株研究肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移等生物学行为,以及探索相关信号通路和药物靶点。例如,通过观察 RFP 的荧光变化,了解肿瘤细胞在体内外的生长和分布情况;利用其对嘌呤霉素的抗性,在药物筛选实验中作为对照细胞,研究其他药物对肿瘤细胞的作用效果等。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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