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OP9-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:17
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详细内容
OP9-GFP-Puro稳转株
英文名称 | OP9-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1184 |
中文名称 | GFP 标记的 OP9 稳转株 |
Lot number | OP9-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | MEM + 20% FBS |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
背景知识：
OP9 细胞：OP9 细胞是一种来自小鼠骨髓的基质细胞系，具有造血支持能力，其免疫表型与典型的小鼠间充质干细胞相同，具有较强的克隆形成能力，并且能够被诱导分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞。
稳转株：稳转株即稳定表达的细胞株，是指基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。构建稳转株通常是将外源 DNA/shRNA 克隆到带有某种抗性基因的载体上，重组载体被转染至宿主细胞并整合到其染色体中，能随细胞分裂稳定传递下去，再用载体中所含抗性基因进行筛选，得到稳定表达目的蛋白或稳定沉默特定基因的细胞株。
相关基因：
GFP 基因：即绿色荧光蛋白基因。GFP 在细胞中表达后，在蓝光或紫外光激发下能发出绿色荧光。在 OP9 - GFP - Puro 稳转株中，GFP 基因通常被整合到 OP9 细胞的基因组中，使细胞持续表达 GFP 蛋白，可用于实时观察细胞的状态、定位以及在体内外的追踪等，比如在体外培养过程中，能通过荧光显微镜直接观察细胞的生长、迁移等行为；在动物实验中，可观察细胞在动物体内的分布、归巢等情况。
Puro 基因：即嘌呤霉素抗性基因。嘌呤霉素是一种抗生素，能够抑制细胞蛋白质的合成，从而杀死细胞。而含有 Puro 基因的细胞能够表达一种酶，使嘌呤霉素失活，从而使细胞在含有嘌呤霉素的培养基中能够存活并生长。在构建 OP9 - GFP - Puro 稳转株时，Puro 基因与 GFP 基因通常在同一个载体上，利用嘌呤霉素对转染后的细胞进行筛选，只有成功整合了外源基因（包括 GFP 基因和 Puro 基因）的细胞才能在筛选压力下存活并形成稳定表达 GFP 的细胞株。
构建方法：通常先将含有 GFP 基因和 Puro 基因的表达载体通过慢病毒感染或脂质体转染等方法导入 OP9 细胞。如果是慢病毒感染，先确定 OP9 细胞的培养条件、增值速度等相关信息，进行预实验确定感染复数（MOI）值以及筛选药物嘌呤霉素的用量。将 OP9 细胞铺板，根据细胞量和 MOI 值计算并加入适量的慢病毒进行感染，感染一段时间后换液，继续培养。在转染 48 小时后，使用嘌呤霉素进行筛选，去除未成功转染的细胞。筛选结束后进行单克隆化，挑选出阳性克隆进行培养，最终得到稳定表达 GFP 的 OP9 - GFP - Puro 稳转株。
应用领域：
细胞生物学研究：可用于观察 OP9 细胞的增殖、分化、迁移等过程。例如，在研究 OP9 细胞向脂肪细胞分化时，通过观察 GFP 的荧光变化，可以直观地了解细胞形态和分布的改变，为研究细胞分化机制提供依据。
基因功能研究：如果将某些目的基因与 GFP 基因融合，构建到相同的载体上并转染到 OP9 - GFP - Puro 稳转株中，可以通过观察 GFP 的表达情况来研究目的基因的表达、定位和功能。比如，研究某个与造血调控相关的基因在 OP9 细胞中的作用机制，可将该基因与 GFP 融合表达，观察其在细胞内的定位以及对细胞造血支持功能的影响。
药物研发和筛选：利用 OP9 - GFP - Puro 稳转株可以建立药物筛选模型。例如，筛选对 OP9 细胞增殖、分化有影响的药物，或者研究药物对某些基因表达的调控作用。通过观察药物处理后细胞中 GFP 的表达变化以及细胞的生物学行为改变，来评估药物的疗效和作用机制，为药物研发提供实验依据。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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