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OCI-LY7-RFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/22 8:33:24
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详细内容
OCI-LY7-RFP-Puro稳转株
英文名称 | OCI-LY7-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2042 |
中文名称 | RFP 标记的 OCI-LY7 稳转株 |
Lot number | OCI-LY7-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | IMEM + 20% FBS+ 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
一、名称拆解与核心概念
1. OCI-LY7 细胞系
来源：OCI-LY7 是一种源自人类弥漫性大 B 细胞淋巴瘤（DLBCL）的永生化细胞系，常用于淋巴瘤相关的分子机制、药物筛选等研究。
特性：具有 B 细胞淋巴瘤的典型生物学特征，如异常增殖能力、特定表面标志物表达（如 CD19、CD20 等）。
2. RFP（红色荧光蛋白）
功能：作为报告基因，通过基因工程手段整合到细胞基因组中，使细胞稳定表达 RFP。RFP 在荧光显微镜下可发出红色荧光，用于实时追踪细胞位置、观察细胞形态、监测细胞增殖或迁移等。
优势：相较于其他荧光蛋白（如 GFP），RFP 的激发和发射波长较长，组织穿透性更强，适用于深层组织或活体成像研究。
3. Puro（嘌呤霉素）
作用：是一种抗生素，常用于稳转株筛选。通过构建携带嘌呤霉素抗性基因的质粒载体，将其转入 OCI-LY7 细胞后，未成功整合外源基因的细胞会被嘌呤霉素杀死，而成功整合的稳转株可存活并稳定表达目标基因（如 RFP）。
意义：确保稳转株中 RFP 基因的稳定遗传，避免因传代培养导致的基因丢失。
二、稳转株的构建流程
载体构建
设计含 RFP 编码序列和嘌呤霉素抗性基因的质粒载体（如 pLVX-RFP-Puro），通常利用限制性内切酶酶切和 DNA 连接酶连接完成构建。
细胞转染 / 感染
方法：对于难转染的细胞（如原代细胞或某些癌细胞系），常用慢病毒感染法：将重组质粒与包装质粒共转染至 293T 细胞，生产携带 RFP 基因的慢病毒颗粒，再将病毒液感染 OCI-LY7 细胞。
嘌呤霉素筛选
感染后 48⁻⁷2 小时，加入嘌呤霉素（浓度需预先通过梯度实验确定）进行筛选，持续约 1-2 周，直至未转染细胞全部死亡，存活细胞即为稳定表达 RFP 的 OCI-LY7 稳转株。
单克隆化与鉴定
通过有限稀释法或流式细胞分选（FACS）获得单克隆细胞，扩大培养后利用荧光显微镜、流式细胞术验证 RFP 表达的均一性和稳定性。
三、应用场景
细胞示踪与成像研究
在肿瘤移植模型中，将 OCI-LY7-RFP-Puro 细胞注射至小鼠体内，通过活体荧光成像技术追踪肿瘤细胞的转移路径、生长动态（如图片示例：[此处可插入荧光显微镜下细胞形态图]）。
药物疗效评估
利用 RFP 的荧光强度反映细胞数量变化，例如通过 CCK-8 或流式细胞术检测药物处理后稳转株的增殖抑制率，或通过 Transwell 实验分析药物对细胞迁移能力的影响。
分子机制研究
结合 RNA 干扰（shRNA）或 CRISPR-Cas9 技术，构建同时表达 RFP 和基因编辑元件的稳转株，用于研究特定基因敲低 / 敲除对 OCI-LY7 细胞表型的影响（如凋亡、周期阻滞等）。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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